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stevenshi021

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感谢参与，应助指数 +1
bolysu(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-06-05 10:32:31

我感觉你检查一下你心的重组质粒的ORF,有可能的东西是进去了，但是发了了移码了。

2楼2013-06-05 10:27:52

bolysu

禁虫 (著名写手)

本帖内容被屏蔽

3楼2013-06-05 11:02:15

stevenshi021

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gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-10-04 00:52:20

移码就会有提前终止的可能性，如果蛋白很小你在胶上就看不到了！

4楼2013-06-06 09:55:23

wuyao0513

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测下序吧！看看有没有提前终止

5楼2013-10-02 12:14:49

凌波丽

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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-10-03 02:35:05

酶切位点的不同的选择可能会造成开放阅读框的移码突变。开放阅读框的移码突变有可能会形成新的终止密码子而终止翻译；也可能造成新的mRNA的二级结构，而使得核糖体无法结合到mRNA，或者核糖体结合到mRNA也因为空间位阻而无法翻译，或者新的mRNA的二级结形成了新的终止子结构而使翻译终止。翻译出来的错误的多肽很可能会被细菌细胞内的酶快速降解掉，比如通过tmRNA机制。
其实Riboswitch就是没有改变mRNA的一级结构，而通过改变mRNA的二级结构而开启或者终止核糖体的翻译的进行。

6楼2013-10-03 00:48:45

wuyao0513

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可能序列不对，还有可能就是你换酶切位点时把稀有密码子加进去了！！

7楼2013-10-09 10:51:39