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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 酶切位点的选择对蛋白表达有影响吗
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bolysu

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1楼 2013-06-05 10:14:31
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stevenshi021

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
bolysu(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-06-05 10:32:31
我感觉你检查一下你心的重组质粒的ORF,有可能的东西是进去了，但是发了了移码了。
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2楼2013-06-05 10:27:52
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bolysu

禁虫 (著名写手)
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3楼2013-06-05 11:02:15
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stevenshi021

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-10-04 00:52:20
移码就会有提前终止的可能性，如果蛋白很小你在胶上就看不到了！
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4楼2013-06-06 09:55:23
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wuyao0513

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

测下序吧！看看有没有提前终止
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5楼2013-10-02 12:14:49
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-10-03 02:35:05
酶切位点的不同的选择可能会造成开放阅读框的移码突变。开放阅读框的移码突变有可能会形成新的终止密码子而终止翻译；也可能造成新的mRNA的二级结构，而使得核糖体无法结合到mRNA，或者核糖体结合到mRNA也因为空间位阻而无法翻译，或者新的mRNA的二级结形成了新的终止子结构而使翻译终止。翻译出来的错误的多肽很可能会被细菌细胞内的酶快速降解掉，比如通过tmRNA机制。
其实Riboswitch就是没有改变mRNA的一级结构，而通过改变mRNA的二级结构而开启或者终止核糖体的翻译的进行。
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6楼2013-10-03 00:48:45
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wuyao0513

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

可能序列不对，还有可能就是你换酶切位点时把稀有密码子加进去了！！
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7楼2013-10-09 10:51:39
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