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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 没有信号肽会影响蛋白的表达过程
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yeshui

铁虫 (小有名气)

[求助] 没有信号肽会影响蛋白的表达过程

做蛋白表达总是表达不出来，Rossetta宿主菌也尝试过了，是不是没有信号肽的话，就表达不出来啊？
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1楼2011-11-22 16:36:03
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回帖置顶 ( 共有1个 )

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
西瓜(金币+2): Good！ 2011-11-23 17:50:27
西瓜: 回帖置顶 Good 2011-11-23 20:19:33
引用回帖:
5楼: Originally posted by yeshui at 2011-11-22 19:54:28:
那如果没有信号肽，是不是蛋白就不会分泌在菌液的上清中了啊？

没有肯定不能分泌表达的。但要注意，能不能分泌不是蛋白本身的信号肽，而是载体上或者另外加的宿主常用的信号肽，异源表达时蛋白本身所带的信号肽一般宿主不能识别的，不能指导分泌表达，也不会被切割的。
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yeshui
7楼2011-11-23 10:15:59
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普通回帖

blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
yeshui(金币+3): 我觉得那个不是我的问题的关键啊 2011-11-22 19:28:40
西瓜(金币+2): 正解，楼主应该优化下表达条件。 2011-11-23 17:49:30
应该不是，一般表达时去掉信号肽，楼主的蛋白表达不出来可以考虑IPTG浓度，诱导温度等因素是否合理？
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jiayoubashaonian
2楼2011-11-22 19:00:11
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
yeshui(金币+3): 2011-11-22 19:29:02
西瓜(金币+2): Good！ 2011-11-23 17:49:45
能不能表达跟有没有信号肽没有关系的，能不能分泌表达才跟信号肽有关系的。你的不表达跟信号肽没有一点关系。
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3楼2011-11-22 19:16:06
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by lxj341401 at 2011-11-22 19:16:06:
能不能表达跟有没有信号肽没有关系的，能不能分泌表达才跟信号肽有关系的。你的不表达跟信号肽没有一点关系。

同意楼上，建议楼主能不能优化一下其他条件，蛋白表达有时改变一下条件就会使表达量变化很大。
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jiayoubashaonian
4楼2011-11-22 19:38:36
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yeshui

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lxj341401 at 2011-11-22 19:16:06:
能不能表达跟有没有信号肽没有关系的，能不能分泌表达才跟信号肽有关系的。你的不表达跟信号肽没有一点关系。

那如果没有信号肽，是不是蛋白就不会分泌在菌液的上清中了啊？
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5楼2011-11-22 19:54:28
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lilihuang1125

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
西瓜(金币+2): 鼓励分享经验！ 2011-11-23 17:50:11
LZ可以试着把信号肽切掉， 再做个表达，有时候信号肽影响很大，我有个同学做就遇到过这种情况，之前一直表达的不好，后来试着把信号肽切掉问题就解决了。她做的是植物的蛋白
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6楼2011-11-23 09:52:06
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yeshui

铁虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by lxj341401 at 2011-11-23 10:15:59:
没有肯定不能分泌表达的。但要注意，能不能分泌不是蛋白本身的信号肽，而是载体上或者另外加的宿主常用的信号肽，异源表达时蛋白本身所带的信号肽一般宿主不能识别的，不能指导分泌表达，也不会被切割的。

那我该怎样看载体和宿主的信号肽呢，请详细解释下吧
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8楼2011-11-24 16:15:54
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longage.gene

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by lxj341401 at 2011-11-23 11:15:59:
没有肯定不能分泌表达的。但要注意，能不能分泌不是蛋白本身的信号肽，而是载体上或者另外加的宿主常用的信号肽，异源表达时蛋白本身所带的信号肽一般宿主不能识别的，不能指导分泌表达，也不会被切割的。

生物这东西，说肯定这个词，可要下很大决心的。最近我与一个审稿人讨论时，查了些文献发现蛋白分泌不能说没信号肽就不分泌！
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9楼2011-11-24 21:58:16
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scofield111

银虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by lxj341401 at 2011-11-23 10:15:59
没有肯定不能分泌表达的。但要注意，能不能分泌不是蛋白本身的信号肽，而是载体上或者另外加的宿主常用的信号肽，异源表达时蛋白本身所带的信号肽一般宿主不能识别的，不能指导分泌表达，也不会被切割的。...

我想问一下，不去除蛋白本身的信号肽 为什么会对酶活性造成一定得影响
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10楼2015-11-08 09:21:56
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