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【求助/交流】蛋白酶去信号肽可以正常表达吗?和表达载体有关吗? 已有3人参与
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| 我最近在做木瓜蛋白酶的克隆表达,去除自身信号肽的26个氨基酸(78个碱基)后,设计引物克隆后面部分的碱基序列,用的表达载体是pet20b和一个本实验室的热激载体,这两个载体上都有信号肽序列,经过诱导表达后发现pet20b的可以表达目的蛋白,但活性较小,热激载体的无目的蛋白条带,所以现在就在考虑是否蛋白酶去除了自身信号肽后表达活性受较大影响,和表达载体会有关系吗,或者该植物来源的木瓜蛋白酶需要在原核中改成其可以识别的优势密码子表达才可,请教这里的高手给些建议和意见,谢谢了! |
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lxj341401
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