| 查看: 5146 | 回复: 12 | ||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||||
maweisimple铁虫 (小有名气)
|
[交流]
荧光PCR 内控
|
|||
| 大家好，最近在思考，实时荧光PCR的试剂往往除了阳性质控品，还添加另一种荧光信号的内控，有些不解，阳性质控品不就是证明试剂没问题的吗，如果阳性质控有信号，外控无信号，说明提取的样本有抑制，而反应试剂是没问题，为什么还要加内控呢？请大家各抒己见，不吝赐教！ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 QPCR 问题简答 |
» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有221人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 荧光定量PCR能不能做普通PCR
已经有9人回复
- 求助，实时荧光定量PCR没有CT值，如下图
已经有16人回复
- 荧光定量PCR产物长度一般在哪个范围比较好
已经有11人回复
- 荧光定量Pcr问题求助
已经有7人回复
- 请教用荧光pcr仪如何做lamp扩增
已经有16人回复
- 请教荧光定量PCR结果图？我的这张能看出来什么问题？
已经有24人回复
- 关于荧光定量PCR的数据分析
已经有8人回复
- 荧光定量PCR溶解曲线问题
已经有8人回复
- 关于荧光定量PCR引物设计的问题
已经有7人回复
- 荧光定量PCR扩增曲线怎么成这样了呢？为什么?
已经有15人回复
- 实时荧光定量PCR过程问题
已经有11人回复
- 荧光定量PCR的相对定量怎么用？
已经有5人回复
- 相对荧光定量PCR
已经有11人回复
- 荧光定量PCR与普通PCR
已经有12人回复
- 荧光定量PCR-绝对定量
已经有4人回复
- 荧光定量PCR结果如何处理
已经有12人回复
- 请教PCR高手，使用SYBR Green I法进行荧光定量PCR对于产物大小有什么要求？
已经有21人回复
- 荧光定量PCR ，条件优化
已经有13人回复
- 荧光定量PCR用10ul反应成吗？
已经有21人回复
- 荧光定量PCR实验技术
已经有15人回复
- 合适的荧光定量PCR管
已经有11人回复
- 荧光pcr标准曲线问题
已经有21人回复
- 荧光PCR中，荧光阀值的问题
已经有11人回复
- 荧光定量PCR与普通PCR产物不一样？
已经有6人回复
lovelydong
铜虫 (小有名气)
- 应助: 7 (幼儿园)
- 金币: 144.1
- 红花: 1
- 帖子: 63
- 在线: 25.1小时
- 虫号: 1782007
- 注册: 2012-04-27
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
maweisimple: 金币+1 2015-02-11 12:44:43
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
maweisimple: 金币+1 2015-02-11 12:44:43
|
测定的DNA是你提取的总DNA，未必含有你外标那段基因（当然也只有极端的情况才会出现这种情况），这个时候引入的各种阳性质控、外标以及内标才能发挥它们的作用，辅助你分析问题所在。不知道这样解释能否帮助你？ |
maweisimple7楼2015-02-11 10:28:57
2楼2015-02-10 15:16:59
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
maweisimple: 金币+3, 很棒 2015-02-10 16:49:07
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
maweisimple: 金币+3, 很棒 2015-02-10 16:49:07
| 阳性质控，是为了说明你的试剂没有问题，由于阳性质控并不和你的具体的每一个样本一管扩增。而有时候某个样本是阴性，但是你无法判断是由于真的是阴性呢还是标本有抑制物导致的阴性，这时候就引入内控，也就是所谓的内标，它分两种，一种是管家基因，一种是额外添加进去的质粒或者其它（正常的样本内控或内标就肯定为阳性），和样本一起参与提取，这时候如果标本的目的片段是阴性，而内标也是阴性，说明这个标本可能有抑制物，因为连内标都没有出来，可以稀释下临床样本进行检测，而如果标本的目的片段是阴性，而内标是阳性，那么结果为正常，即，此份样本你的目的片段为阴性，不知道这样解释你是否明白。内标主要用来考察样本扩增的假阴性！ |
3楼2015-02-10 15:57:42
maweisimple
铁虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 3764.2
- 散金: 14
- 红花: 2
- 帖子: 238
- 在线: 43.1小时
- 虫号: 940969
- 注册: 2010-01-12
- 性别: MM
- 专业: 抗体工程学
4楼2015-02-10 16:48:20
100