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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR用水的问题
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suijinkai

木虫 (小有名气)

[交流] PCR用水的问题

做了这么久PCR，相信大家都知道水要用18.2兆欧的去离子水，但是我一直没有弄明白为什么要灭菌。
请明白这个问题的虫虫赐教！！如果能附上答案的证据最好！
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机会只给有准备的人！
1楼 2015-01-30 14:25:13
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

cosign

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
曾经马上就要做实验了，没有ddH2O，故也尝试了一下没有灭菌的去离子水，表示一切正常，但是平常一般都是灭过菌，也算是一种心理安慰吧我觉得
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9楼2015-01-30 20:42:16
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
suijinkai(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-01-30 22:34:09
只要是做实验，最好用去离子水或已灭菌的水，不能用自来水，杂质太多。
而且分子实验本来就已经非常非常微观了，任何一点杂质都会对结果结果有影响，菌也有基因（DNA）吧，对扩增结果会有影响的
不知道你。。。
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todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
4楼2015-01-30 14:34:06
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zxd95

至尊木虫 (著名写手)
★
suijinkai: 金币+1, 其实俺一直也这样认为，但是不能确定 2015-01-31 17:16:07
用18.2MΩ的水即可，是去离子水！不用灭菌！！！
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追梦的人
11楼2015-01-30 22:33:46
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ptttmt

银虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
简直了这问题问的，去离子水得用容器装吧？水在容器内长期存放能确保无菌？？灭菌就是确保无菌水在容器中能无菌长期保存，严谨一点的做法罢了。
想当年，实验室超纯水机罢工，直接用饮水机桶装水接来一样的做PCR！

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suijinkai
12楼2015-01-31 05:04:05
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十年板蓝根

铁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
昨天我一同事直接用PCR仪98度变性大肠杆菌，然后加体系等~，再上PCR仪，下来后让我跑电泳，发现点样孔及条带周围都是亮的斜的条带，故我认为灭菌，去离子水是为了减少非特异条带等，易于纯化
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崇尚独立精神与自由思想
13楼2015-01-31 08:53:23
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普通回帖

ZloveA
★
suijinkai(金币+1): 谢谢参与
祝福
2楼2015-01-30 14:31:39
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messengermu
★
suijinkai(金币+1): 谢谢参与
3楼2015-01-30 14:32:07
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zff922
5楼2015-01-30 14:38:23
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312409924
6楼2015-01-30 14:41:35
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titus0805

铁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-01-30 14:34:06
只要是做实验，最好用去离子水或已灭菌的水，不能用自来水，杂质太多。
而且分子实验本来就已经非常非常微观了，任何一点杂质都会对结果结果有影响，菌也有基因（DNA）吧，对扩增结果会有影响的
不知道你。。。

其实更多是一种心理安慰。。。
话说120摄氏度破坏不了dna的磷酸键吧，所以就算灭菌也灭不了DNA----肺炎双球菌那个实验
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7楼2015-01-30 15:03:13
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huangchj03

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
suijinkai(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-01-30 22:34:20
如果含有微生物的话，微生物的生理代谢会改变水中的酸碱度、离子平衡等多种成分，所以严格的PCR用水是需要灭菌的，减少微生物的代谢的影响
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8楼2015-01-30 16:21:11
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still2008

至尊木虫 (著名写手)

破碎世界的守护者
★ ★
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suijinkai(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-01-30 22:34:32
灭菌，除去活的细菌或微生物的过程，而不是破坏核酸的酯键，18.2的超纯水也有可能被污染，而且这些水也一般不会用不完就丢弃，还是会保存在4度，所以用高温高压灭菌，多一个保障，个人愚见。

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有时一本正经，有时胡言乱语。
10楼2015-01-30 22:06:40
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