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suijinkai

木虫 (小有名气)

[交流] PCR用水的问题

做了这么久PCR,相信大家都知道水要用18.2兆欧的去离子水,但是我一直没有弄明白为什么要灭菌。
请明白这个问题的虫虫赐教!!如果能附上答案的证据最好!
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cosign

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
曾经马上就要做实验了,没有ddH2O,故也尝试了一下没有灭菌的去离子水,表示一切正常,但是平常一般都是灭过菌,也算是一种心理安慰吧我觉得
9楼2015-01-30 20:42:16
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
suijinkai(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-01-30 22:34:09
只要是做实验,最好用去离子水或已灭菌的水,不能用自来水,杂质太多。
而且分子实验本来就已经非常非常微观了,任何一点杂质都会对结果结果有影响,菌也有基因(DNA)吧,对扩增结果会有影响的
不知道你。。。
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
4楼2015-01-30 14:34:06
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zxd95

至尊木虫 (著名写手)


suijinkai: 金币+1, 其实俺一直也这样认为,但是不能确定 2015-01-31 17:16:07
用18.2MΩ的水即可,是去离子水!不用灭菌!!!
追梦的人
11楼2015-01-30 22:33:46
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ptttmt

银虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
简直了这问题问的,去离子水得用容器装吧?水在容器内长期存放能确保无菌??灭菌就是确保无菌水在容器中能无菌长期保存,严谨一点的做法罢了。
想当年,实验室超纯水机罢工,直接用饮水机桶装水接来一样的做PCR!

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12楼2015-01-31 05:04:05
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十年板蓝根

铁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
昨天我一同事直接用PCR仪98度变性大肠杆菌,然后加体系等~,再上PCR仪,下来后让我跑电泳,发现点样孔及条带周围都是亮的斜的条带,故我认为灭菌,去离子水是为了减少非特异条带等,易于纯化
崇尚独立精神与自由思想
13楼2015-01-31 08:53:23
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普通回帖

suijinkai(金币+1): 谢谢参与
祝福
2楼2015-01-30 14:31:39
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suijinkai(金币+1): 谢谢参与
3楼2015-01-30 14:32:07
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5楼2015-01-30 14:38:23
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6楼2015-01-30 14:41:35
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titus0805

铁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-01-30 14:34:06
只要是做实验,最好用去离子水或已灭菌的水,不能用自来水,杂质太多。
而且分子实验本来就已经非常非常微观了,任何一点杂质都会对结果结果有影响,菌也有基因(DNA)吧,对扩增结果会有影响的
不知道你。。。

其实更多是一种心理安慰。。。
话说120摄氏度破坏不了dna的磷酸键吧,所以就算灭菌也灭不了DNA----肺炎双球菌那个实验
7楼2015-01-30 15:03:13
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huangchj03

金虫 (小有名气)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
suijinkai(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-01-30 22:34:20
如果含有微生物的话,微生物的生理代谢会改变水中的酸碱度、离子平衡等多种成分,所以严格的PCR用水是需要灭菌的,减少微生物的代谢的影响
8楼2015-01-30 16:21:11
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still2008

至尊木虫 (著名写手)

破碎世界的守护者

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
suijinkai(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-01-30 22:34:32
灭菌,除去活的细菌或微生物的过程,而不是破坏核酸的酯键,18.2的超纯水也有可能被污染,而且这些水也一般不会用不完就丢弃,还是会保存在4度,所以用高温高压灭菌,多一个保障,个人愚见。

[ 发自小木虫客户端 ]
有时一本正经,有时胡言乱语。
10楼2015-01-30 22:06:40
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