应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 向各位有经验者求助，提取DNA问题
51/1返回列表
查看: 1774  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

lazyren

铁虫 (小有名气)

[求助] 向各位有经验者求助，提取DNA问题 已有3人参与

除了白-4是外类群，其他均为同一属植物，其为灌木或乔木

实验方法是：
1.取样约0.02g，液氮研磨
2.CTAB 800微升+巯基乙醇15微升，65摄氏度温浴1小时
3.氯仿：异戊醇（24：1）洗两次，离心12000rpm，10分钟，轻摇乳化10分钟，冰浴15分钟
4.取上清，加入5M NaCl体积为上清1/5,  异丙醇（-20摄氏度）等体积加入（即上清+NaCl），冰冻3h，离心10000rpm,10分钟
5.冰冻的75%乙醇（-20摄氏度）洗两次，加500微升，离心10000rpm，10min,冰冻无水乙醇洗一次，加200微升，离心，晾干30分钟
6.TE加50微升+RNase(0.1mg/ml) 2微升，温浴37摄氏度 1小时

电泳
1%的琼脂糖凝胶，goldview 2微升/40微升TBE与琼脂糖混合液
70v，1.5h

以上，做了几次，感觉还是降解，请问有朋友能提点提点吗？

向各位有经验者求助，提取DNA问题
20150129(5).jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-01-30 10:06:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
看了你的提取方案，可能你的提取方法需要改进。不知道这是否是成熟的提取方法？
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2015-01-30 11:16:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

Gin—红与黑

金虫 (小有名气)
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 应助指数-1, 无应助 2015-01-30 22:37:29
第一次见这样惨不忍睹的条带。。。。

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
2楼2015-01-30 10:38:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lazyren

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Gin—红与黑 at 2015-01-30 10:38:14
第一次见这样惨不忍睹的条带。。。。

求指导，我也不想惨不忍睹的说
赞一下 回复此楼
3楼2015-01-30 10:48:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lazyren

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-01-30 11:16:33
看了你的提取方案，可能你的提取方法需要改进。不知道这是否是成熟的提取方法？

是结合了两个曾经用过的实验方法修改出来的方法，请问有哪些方面可以改进？
赞一下 回复此楼
5楼2015-01-30 11:34:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +8 炎黄贵胄 2026-08-22 9/450 2026-08-26 07:47 by WASM
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +21 羊腰板 2026-08-21 24/1200 2026-08-26 07:20 by finnigan
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 PbwVEMK5haaE 2026-08-25 6/300 2026-08-26 06:57 by cNXvBfCpiZOM
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 Qj98d49dHFb9 2026-08-25 5/250 2026-08-26 04:57 by cNXvBfCpiZOM
[基金申请] 今天务委会开完了，明天出结果吗 +18 angus9576 2026-08-25 22/1100 2026-08-26 00:41 by merchancy
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 放榜前的不淡定 20+4 snowwithsea 2026-08-19 19/950 2026-08-25 17:57 by chick875
[基金申请] 某些机构，以效率低为荣，以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
[基金申请] 今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 22/1100 2026-08-25 15:36 by 医学老男孩
[基金申请] 人气不行了 +11 fansofjerry 2026-08-21 11/550 2026-08-25 11:04 by 孤独的英雄6
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +5 process2012 2026-08-23 7/350 2026-08-25 09:42 by huixian257
[基金申请] 我面上完蛋了 +13 且听虎啸 2026-08-20 14/700 2026-08-25 09:10 by mrkang
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +25 yaoyewhu2008 2026-08-20 27/1350 2026-08-25 08:01 by Equinoxhua
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +21 koalala 2026-08-24 24/1200 2026-08-24 19:25 by 家与远方
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +14 ziyangfang 2026-08-19 17/850 2026-08-24 18:37 by 哈哈蛤？
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 看来今天不会放榜了？ +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭