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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 求助！关于革兰氏阳性菌DNA提取的问题
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jenoscard

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助！关于革兰氏阳性菌DNA提取的问题 已有3人参与

我现在提革兰氏阳性菌   乳酸杆菌的DNA   死活提不出来  我用的是溶菌酶37度30分钟  不行啊 中间就出现胶体物质一坨在里面 不知道是什么  各位前辈  指点一下吧  你们用的什么方法
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1楼 2012-08-27 00:38:32
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

jenoscard

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
16楼: Originally posted by spice at 2012-08-30 13:42:45
我加入溶菌酶在55度下20分钟，提出来了，看看加入溶菌酶后可以适当升点温看行否、、、

怎么高不会失活哦？
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18楼2012-09-01 10:18:55
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jenoscard

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by ybfang at 2012-08-28 11:46:43
没用过tiangen的，会不会是你取的菌量太多了。试剂盒应该没问题的，肯定是步骤或者是菌有问题。加油...

菌量太多会有造成什么样的后果呢   应该不会吧
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8楼2012-08-29 11:10:32
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木森林coco

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
scelab: 金币+5, 鼓励新虫，多多交流哦~ 2012-09-10 12:10:49
我以前也遇到过你说的一坨的问题，确实是菌液量太大了，3-5ml足以。不知道跟你的情况一样不
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努力就会有收获
20楼2012-09-09 15:54:36
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普通回帖

eagles123

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以用屋里方法破壁，比如bead beating, sonication
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2楼2012-08-27 11:40:02
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ybfang

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
革兰氏阳性菌壁很难破的。最好用DNA试剂盒提取
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共勉！！！！
3楼2012-08-27 12:29:53
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lly198784

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以购买TIAN GEN公司的基因组提取试剂盒，里面有配好的溶菌酶，很好用的。
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4楼2012-08-27 12:33:55
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jenoscard

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lly198784 at 2012-08-27 12:33:55
可以购买TIAN GEN公司的基因组提取试剂盒，里面有配好的溶菌酶，很好用的。

我用的就是天根的呀  里面没有溶菌酶 有推荐的用量  我加了溶菌酶的  还是不行呢   中间没有看到絮状沉淀，而是一坨胶状物质  吸都吸不出来  所以纠结啊
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5楼2012-08-28 10:56:37
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jenoscard

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ybfang at 2012-08-27 12:29:53
革兰氏阳性菌壁很难破的。最好用DNA试剂盒提取

我用的就是天根的呀  里面没有溶菌酶 有推荐的用量  我加了溶菌酶的  还是不行呢   中间没有看到絮状沉淀，而是一坨胶状物质  吸都吸不出来  所以纠结啊
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6楼2012-08-28 10:56:47
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ybfang

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by jenoscard at 2012-08-28 10:56:47
我用的就是天根的呀  里面没有溶菌酶 有推荐的用量  我加了溶菌酶的  还是不行呢   中间没有看到絮状沉淀，而是一坨胶状物质  吸都吸不出来  所以纠结啊...

没用过tiangen的，会不会是你取的菌量太多了。试剂盒应该没问题的，肯定是步骤或者是菌有问题。加油
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共勉！！！！
7楼2012-08-28 11:46:43
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ybfang

木虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by jenoscard at 2012-08-29 11:10:32
菌量太多会有造成什么样的后果呢   应该不会吧...

不用挑太多的。一两个菌落足以
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共勉！！！！
9楼2012-08-29 11:22:08
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sanlang_qq

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
还是用试剂盒吧，我一直在做，挺好的
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然后呢
10楼2012-08-29 16:33:17
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