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求助！关于革兰氏阳性菌DNA提取的问题
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求助！关于革兰氏阳性菌DNA提取的问题
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我现在提革兰氏阳性菌 乳酸杆菌的DNA 死活提不出来 我用的是溶菌酶37度30分钟 不行啊 中间就出现胶体物质一坨在里面 不知道是什么 各位前辈 指点一下吧 你们用的什么方法
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【求助/交流】革兰氏阳性菌细胞2D用总蛋白样品制备方法？
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1楼
2012-08-27 00:38:32
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4楼
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Originally posted by
lly198784
at 2012-08-27 12:33:55
可以购买TIAN GEN公司的基因组提取试剂盒，里面有配好的溶菌酶，很好用的。
我用的就是天根的呀 里面没有溶菌酶 有推荐的用量 我加了溶菌酶的 还是不行呢 中间没有看到絮状沉淀，而是一坨胶状物质 吸都吸不出来 所以纠结啊
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5楼
2012-08-28 10:56:37
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3楼
:
Originally posted by
ybfang
at 2012-08-27 12:29:53
革兰氏阳性菌壁很难破的。最好用DNA试剂盒提取
我用的就是天根的呀 里面没有溶菌酶 有推荐的用量 我加了溶菌酶的 还是不行呢 中间没有看到絮状沉淀，而是一坨胶状物质 吸都吸不出来 所以纠结啊
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6楼
2012-08-28 10:56:47
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7楼
:
Originally posted by
ybfang
at 2012-08-28 11:46:43
没用过tiangen的，会不会是你取的菌量太多了。试剂盒应该没问题的，肯定是步骤或者是菌有问题。加油...
菌量太多会有造成什么样的后果呢 应该不会吧
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8楼
2012-08-29 11:10:32
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11楼
:
Originally posted by
weiyasong
at 2012-08-30 08:54:00
（一）细菌总DNAD 提取
革兰氏阳性菌DNA提取方法(提取基因组DNA)
1. 3-6ml 细菌过夜培养液, 5000rpm离心10分钟, 弃上清
2. 加0.5ml TE悬浮沉淀,并加75μl 溶菌酶（20mg/ml）溶液，40°C保温30分钟
3. 加50μl, ...
我用的是试剂盒 不过前面应该可以参考下 写啦
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13楼
2012-08-30 10:38:01
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12楼
:
Originally posted by
limin2012
at 2012-08-30 10:08:17
胶质物质加无菌水可以溶吗？DNA浓度太大也会吸不出来。
没试过 就是很大一坨在里面 透明的 也不像DNA
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14楼
2012-08-30 10:40:01
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9楼
:
Originally posted by
ybfang
at 2012-08-29 11:22:08
不用挑太多的。一两个菌落足以...
我用的液体培养基呢
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17楼
2012-09-01 10:17:50
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16楼
:
Originally posted by
spice
at 2012-08-30 13:42:45
我加入溶菌酶在55度下20分钟，提出来了，看看加入溶菌酶后可以适当升点温看行否、、、
怎么高不会失活哦？
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18楼
2012-09-01 10:18:55
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