| 查看: 2829 | 回复: 19 | ||
美丽的家园金虫 (正式写手)
|
[求助]
放线菌DNA 提取不出来，第一次做这方面的，没经验，还望指正
|
|
???: a. ??TE??????????????????Σ???????1000 ??L TE????????????12,000 r/min????2 min???????壬???l?κ???????200 ??L TE?????????; b. ????100 ??L????(10 mg/mL TE???)?????У?36?????30 min????????????30 min; c. ????20 ??L?????K(5 mg/mL????)??55?????2 h?????????30 min; d. ????150 ??L10% SDS??65?????30 min?????????30 min; e. ??????????????/??????????12,000 r/min????5 min????????壬??????; f. ????????????????????12,000 r/min????5 min?????????; g. ????0.1?? 3M NaAc???????????2???????????é?20?? 30 min??12,000 r/min????5 min??????; h. 75%??????2??3?Σ?????????20 ??LTE???DNA??4?汣?档 ????????????????????????????????????????????20-30 ??L????????DNA?????????????????????????????????????DNA?????????????????????????????Σ?????????????? ???????SDS???η???SDS????20?? 500??L ,0.5 mol/L EDTA l??????????????;5mol/L NaCl 100 ??L ??2??CTAB/NaCl 80 ??L ????,??????????????DNA????????????а????????????????????20??SDS?м?NaAc?????????????????????????????????SDS???SDS????DNA?γ????????????Σ?????????????????DNA ?????????.SDS??????????????????????? ?й?????????ó?????????????????Ч???????Щ??? |
回复此楼» 本帖已获得的红花（最新10朵）
美丽的家园» 猜你喜欢
0703化学调剂，求各位老师收留
已经有8人回复
-
070303一志愿西北大学学硕310找调剂
已经有8人回复
-
085600材料与化工 求调剂
已经有14人回复
-
本人考085602 化学工程 专硕
已经有13人回复
-
材料与化工求调剂
已经有3人回复
-
283求调剂
已经有13人回复
-
312求调剂
已经有4人回复
-
285求调剂
已经有6人回复
-
材料与化工专硕调剂
已经有3人回复
-
0703化学调剂 ，六级已过，有科研经历
已经有6人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 土壤微生物DNA提取不出来，是什么原因？
已经有19人回复
- 有关基因组提取问题
已经有19人回复
- 大家来说说做southern blot时，基因组DNA的提取方法
已经有39人回复
- 揪心的菌落PCR
已经有16人回复
- 放线菌DNA的提取
已经有4人回复
- DNA提取时用到的酚是什么酚？怎么配置？
已经有22人回复
- 细菌基因组DNA电泳图谱
已经有6人回复
- 细菌基因组DNA提取 交流
已经有18人回复
- 怎样比较完全地提取土壤中的微生物？
已经有15人回复
- 全血基因组的提取问题
已经有6人回复
- 基因组提取过程中加入溶菌酶有白色沉淀
已经有13人回复
- 细菌全基因组提取求助
已经有7人回复
- 放线菌基因组DNA提取
已经有6人回复
- 放线菌基因组DNA提取后，用TE不溶！！？
已经有20人回复
- 【求助/交流】提取的DNA在-20℃下保存后，怎样解冻？
已经有31人回复
- 【求助/交流】提取DNA总提不出来
已经有23人回复
- 【求助/交流】有没有人做过用水煮法提取DNA的啊，望赐教
已经有21人回复
- 【求助】第一次做微生物实验，请问具塞磨口试管塞上塞子灭菌，会不会爆炸？谢谢！
已经有7人回复
小小亚杰
木虫 (正式写手)
- 应助: 42 (小学生)
- 金币: 3175.9
- 散金: 1032
- 红花: 4
- 帖子: 542
- 在线: 57.3小时
- 虫号: 1485167
- 注册: 2011-11-10
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
美丽的家园: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-08-17 09:40:31
感谢参与，应助指数 +1
美丽的家园: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-08-17 09:40:31
|
酶解法就行了。 如果是少量提取，你溶菌酶37℃放置1小时;大量提取最好37℃摇床上震荡3小时左右，不要怕弄断DNA。 你溶菌酶处理后要看见菌体溶解再往下做。 PK不用2h的，30min也行。 别的操作大体都行，推荐你看一下《一种简单有效的适于PCR操作的放线菌DNA提取方法》这篇文献，可以自己适当修改。 还有少量提取的时侯，除非菌体酶解很彻底，一般看不见DNA，但是溶解在35ul TE中PCR加0.8ul左右当模板没问题。 |
2楼2013-08-17 00:26:26
美丽的家园
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1736.7
- 散金: 30
- 红花: 1
- 帖子: 690
- 在线: 182.8小时
- 虫号: 2090883
- 注册: 2012-10-28
- 专业: 环境分析化学
3楼2013-08-17 09:43:58
xzx018
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 24 (小学生)
- 金币: 15654.7
- 散金: 746
- 红花: 2
- 帖子: 1835
- 在线: 783.5小时
- 虫号: 1058108
- 注册: 2010-07-15
- 专业: 微生物生理与生物化学
4楼2013-08-17 11:09:00
小小亚杰
木虫 (正式写手)
- 应助: 42 (小学生)
- 金币: 3175.9
- 散金: 1032
- 红花: 4
- 帖子: 542
- 在线: 57.3小时
- 虫号: 1485167
- 注册: 2011-11-10
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
5楼2013-08-18 00:29:46
美丽的家园
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1736.7
- 散金: 30
- 红花: 1
- 帖子: 690
- 在线: 182.8小时
- 虫号: 2090883
- 注册: 2012-10-28
- 专业: 环境分析化学
没有其他办法了吗？ 6楼2013-08-18 11:07:23
美丽的家园
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1736.7
- 散金: 30
- 红花: 1
- 帖子: 690
- 在线: 182.8小时
- 虫号: 2090883
- 注册: 2012-10-28
- 专业: 环境分析化学
7楼2013-08-18 11:09:10
xzx018
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 24 (小学生)
- 金币: 15654.7
- 散金: 746
- 红花: 2
- 帖子: 1835
- 在线: 783.5小时
- 虫号: 1058108
- 注册: 2010-07-15
- 专业: 微生物生理与生物化学
8楼2013-08-18 13:52:07
小小亚杰
木虫 (正式写手)
- 应助: 42 (小学生)
- 金币: 3175.9
- 散金: 1032
- 红花: 4
- 帖子: 542
- 在线: 57.3小时
- 虫号: 1485167
- 注册: 2011-11-10
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
9楼2013-08-19 00:23:43
lmhzy1987
金虫 (正式写手)
- 应助: 27 (小学生)
- 金币: 1086.1
- 红花: 1
- 帖子: 328
- 在线: 153.4小时
- 虫号: 1385160
- 注册: 2011-08-31
- 专业: 微生物资源与分类学
10楼2013-08-19 12:59:00
