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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 怎样比较完全地提取土壤中的微生物？
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若水5886

新虫 (小有名气)

[求助] 怎样比较完全地提取土壤中的微生物？

土壤中含有大量微生物，绝大多数都不可培养。为了比较完全的获得较纯的土壤中的微生物（不是要提DNA），可以采用怎样的技术呢？
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1楼 2012-03-30 16:51:57
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

aoaoshch

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+2, Good！ 2012-04-01 17:47:33
若水5886: 金币+1, ★★★很有帮助, 好的 2012-04-06 08:39:23
可以尝试加入不同抗生素，分别分离真菌、酵母、细菌、放线菌。但土壤中微生物种类太多了，你涂板长出单菌落都需要划线纯化吗？你的土样一定保存好，不然重复不出同样的结果的。时间久了，土样里只剩放线菌了，放几个月后就基本是“无菌土”了……
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8楼2012-03-31 17:12:05
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yc652090251

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励提供有意义的建议 2012-03-31 09:40:34
若水5886: 金币+1, ★有帮助, 谢谢 2012-04-01 09:01:40
想要尽量多的分离出土壤中的微生物，建议分别用不同的分离培养基分别分离真菌，细菌，放线菌。这样的话会比用一个培养基分出的菌种类多很多。个人建议，希望能对你有用。
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低调做人好么~~
2楼2012-03-30 17:50:00
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yc652090251

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
若水5886: 金币+2, ★★★很有帮助, 很具体的方案 2012-04-01 09:02:16
西瓜: 金币+2, 鼓励应助 2012-04-01 17:47:17
引用回帖:
3楼: Originally posted by 若水5886 at 2012-03-31 09:17:09:
很好的建议，那可不可以具体告知分离真菌，细菌，放线菌的分离培养基组份分别是什么呢？谢啦

放线菌的分离，用的培养基是HV.
细菌的分离用LB就行。
真菌的话用PDA培养基。配方都很普遍的，百度一下就能找到的。
但是我要说的是正常分菌的话，都是针对一种菌而分的，所以培养基中会加入些抗其他菌的抗生素之类的药品。不知道这么分，染菌（比如分放线菌的培养基中也有细菌或真菌的出现）对你要的结果有没有影响。
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低调做人好么~~
4楼2012-03-31 10:13:57
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swaucq

金虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 若水5886 at 2012-03-31 14:00:50:
这个方法不错，如果我只是想把土壤里的微生物提取出来，不是想富集呢？用什么来分散土壤颗粒，提取微生物呢？

可以用无菌水稀释土壤后，加灭过菌的玻璃珠，滚珠法分散悬液，涂平板。
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不卑不亢
9楼2012-03-31 18:02:46
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bear0329

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
若水5886: 金币+2, ★★★很有帮助, 很不错滴建议 2012-04-01 16:46:25
西瓜: 金币+2, good 2012-04-01 17:50:43
一般细菌用牛肉膏，真菌用孟加拉红，放线菌有改良高氏。但是你要尽可能多的提取。那你要考虑是厌氧和好痒，还有就是上面提到的土壤浸汁是不错的选择哦
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以马内利！
13楼2012-04-01 11:14:01
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兔小白

铁虫 (正式写手)
用无菌生理盐水稀释土壤后 用磁力搅拌器搅拌二十分钟 效果很好的
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15楼2012-11-21 17:01:11
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普通回帖

若水5886

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yc652090251 at 2012-03-30 17:50:00:
想要尽量多的分离出土壤中的微生物，建议分别用不同的分离培养基分别分离真菌，细菌，放线菌。这样的话会比用一个培养基分出的菌种类多很多。个人建议，希望能对你有用。

很好的建议，那可不可以具体告知分离真菌，细菌，放线菌的分离培养基组份分别是什么呢？谢啦
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3楼2012-03-31 09:17:09
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若水5886

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by yc652090251 at 2012-03-31 10:13:57:
放线菌的分离，用的培养基是HV.
细菌的分离用LB就行。
真菌的话用PDA培养基。配方都很普遍的，百度一下就能找到的。
但是我要说的是正常分菌的话，都是针对一种菌而分的，所以培养基中会加入些抗其他菌的抗生 ...

谢谢，我会认真考虑该怎么去分离
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5楼2012-03-31 11:22:17
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swaucq

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
若水5886: 金币+2, ★★★很有帮助, 多谢 2012-04-06 08:38:58
可以试试加土壤浸提液的培养基。
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不卑不亢
6楼2012-03-31 11:26:40
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若水5886

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by swaucq at 2012-03-31 11:26:40:
可以试试加土壤浸提液的培养基。

这个方法不错，如果我只是想把土壤里的微生物提取出来，不是想富集呢？用什么来分散土壤颗粒，提取微生物呢？
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7楼2012-03-31 14:00:50
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进步一点点

至尊木虫 (知名作家)

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★ ★ ★ ★ ★
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若水5886: 金币+2, ★★★很有帮助, 很全面 2012-04-01 10:39:23
西瓜: 金币+3, Good！ 2012-04-01 17:47:58
1.土壤足够新鲜
2.处理足够及时
3.分离目标足够清晰
4.培养基和培养方法足够有效
5.鉴定手段足够先进和准确
3.较难4.5最难做了，想要面面俱到还是很困难的
所以提DNA是比较全面的手段
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科研穷三代，读博毁一生
10楼2012-04-01 01:11:55
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