应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 向各位有经验者求助，提取DNA问题
51/1返回列表
查看: 1783  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

lazyren

铁虫 (小有名气)

[求助] 向各位有经验者求助，提取DNA问题 已有3人参与

除了白-4是外类群，其他均为同一属植物，其为灌木或乔木

实验方法是：
1.取样约0.02g，液氮研磨
2.CTAB 800微升+巯基乙醇15微升，65摄氏度温浴1小时
3.氯仿：异戊醇（24：1）洗两次，离心12000rpm，10分钟，轻摇乳化10分钟，冰浴15分钟
4.取上清，加入5M NaCl体积为上清1/5,  异丙醇（-20摄氏度）等体积加入（即上清+NaCl），冰冻3h，离心10000rpm,10分钟
5.冰冻的75%乙醇（-20摄氏度）洗两次，加500微升，离心10000rpm，10min,冰冻无水乙醇洗一次，加200微升，离心，晾干30分钟
6.TE加50微升+RNase(0.1mg/ml) 2微升，温浴37摄氏度 1小时

电泳
1%的琼脂糖凝胶，goldview 2微升/40微升TBE与琼脂糖混合液
70v，1.5h

以上，做了几次，感觉还是降解，请问有朋友能提点提点吗？

向各位有经验者求助，提取DNA问题
20150129(5).jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-01-30 10:06:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lazyren

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Gin—红与黑 at 2015-01-30 10:38:14
第一次见这样惨不忍睹的条带。。。。

求指导，我也不想惨不忍睹的说
赞一下 回复此楼
3楼2015-01-30 10:48:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

Gin—红与黑

金虫 (小有名气)
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 应助指数-1, 无应助 2015-01-30 22:37:29
第一次见这样惨不忍睹的条带。。。。

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
2楼2015-01-30 10:38:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
看了你的提取方案，可能你的提取方法需要改进。不知道这是否是成熟的提取方法？
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2015-01-30 11:16:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lazyren

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-01-30 11:16:33
看了你的提取方案，可能你的提取方法需要改进。不知道这是否是成熟的提取方法？

是结合了两个曾经用过的实验方法修改出来的方法，请问有哪些方面可以改进？
赞一下 回复此楼
5楼2015-01-30 11:34:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 4/200 2026-08-30 02:09 by ZPa0EcMwuECS
[博后之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-30 01:47 by ZPa0EcMwuECS
[找工作] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-30 01:47 by ZPa0EcMwuECS
[考博] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 4/200 2026-08-30 01:34 by ZPa0EcMwuECS
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +7 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 8/400 2026-08-30 01:14 by ZPa0EcMwuECS
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-30 01:03 by ZPa0EcMwuECS
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 10/500 2026-08-30 00:53 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 国社科申报系统有变化 +3 kynobel 2026-08-23 3/150 2026-08-29 21:57 by 余韵清
[教师之家] 导师吐槽：我怎么摊上了这么个极品研究生！ +9 苏东坡二世 2026-08-23 9/450 2026-08-29 14:41 by hustersqt
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？ +6 gouxfjh 2026-08-28 9/450 2026-08-29 09:59 by jklily
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[文学芳草园] 梦想 +3 myrtle 2026-08-26 3/150 2026-08-27 10:01 by angelyueyi
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 今天务委会开完了，明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 明天应该可查了！？ +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭