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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 大肠杆菌为什么能够表达出有活性的蛋白
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553173045

铜虫 (初入文坛)

[求助] 大肠杆菌为什么能够表达出有活性的蛋白已有3人参与

大肠杆菌应该很容易形成包涵体，而且缺乏形成二硫键的修饰，为什么能够形成有活性的蛋白，比如能够表达有活性的青霉素G酰化酶，形成活性蛋白的原理是什么，形成包涵体的原因是什么？请各位大侠帮下忙，解答这个问题，如果有相关的文献，可否发网址给我，谢谢！
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没有完成不了的事，只有自己愿不愿意去做
1楼2015-01-29 10:52:13
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wanglele87

金虫 (著名写手)
一级结构决定三级结构。
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一生不羁放纵爱自由
3楼2015-01-29 12:44:07
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biowhb

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+3, 鼓励热心应助！ 2015-01-31 20:43:22
大肠杆菌表达的蛋白，分为内源蛋白和外源蛋白。你说的都是外源蛋白。外源蛋白的表达与宿主菌、蛋白定位、蛋白理化性质、蛋白大小、蛋白表达速率等有关。当蛋白定位于胞内，且蛋白表达速率过快，蛋白本身分子间作用力大，蛋白等电点偏离胞内pH环境易于形成包涵体。

活性蛋白，若是可溶性表达，可以表达后直接测活，并不是所有表达蛋白均有活性（只是部分有活性）。
若是包涵体蛋白，则要经变复性，恢复其三维空间结构，恢复其活性。

去CNKI上找找论文，论文有很多的。
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生物技术-基因工程制药
2楼2015-01-29 12:27:32
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553173045

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by biowhb at 2015-01-29 12:27:32
大肠杆菌表达的蛋白，分为内源蛋白和外源蛋白。你说的都是外源蛋白。外源蛋白的表达与宿主菌、蛋白定位、蛋白理化性质、蛋白大小、蛋白表达速率等有关。当蛋白定位于胞内，且蛋白表达速率过快，蛋白本身分子间作用力 ...

大肠杆菌在缺乏二硫键形成机制条件下，形成可溶蛋白也不一定有活性。我想了解活性蛋白形成的策略，我目前想把胰蛋白酶转化大肠杆菌中，可以通过什么元件形成活性蛋白，本身就具有活性。
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没有完成不了的事，只有自己愿不愿意去做
4楼2015-01-30 15:25:43
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553173045

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wanglele87 at 2015-01-29 12:44:07
一级结构决定三级结构。

回答得太简单了！能详细说下形成活性蛋白的策略吗？
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没有完成不了的事，只有自己愿不愿意去做
5楼2015-01-30 15:26:28
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