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小小的尾巴

新虫 (初入文坛)

[求助] 大肠杆菌菌体蛋白有his标签吗已有4人参与

表达的蛋白,纯化后没有目的条带,但是有几条跟菌体蛋白重合的条带,想问问大肠杆菌的菌体蛋白有没有带his标签,我觉得是不是蛋白降解之后和菌体蛋白重合了,所以会出像这样的情况,谢谢!!!
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-04-01 21:24:55
大肠杆菌本身表达的菌体蛋白没有带his标签。
2楼2014-04-01 13:53:20
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liuderong

铁杆木虫 (正式写手)

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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-04-01 21:24:48
大肠杆菌本身表达的蛋白没有his标签,但是它的很多蛋白可以和镍柱结合,这种结合的能力有时还很强。
3楼2014-04-01 20:41:39
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woolley

新虫 (初入文坛)

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是有一些这样的蛋白,含有多个组氨酸或者和填料结合,具体的你可以看看下面的两篇文献,顺便看看你纯化出来的蛋白到底是内源还是降解:
Engineering Escherichia coli BL21(DE3) Derivative Strains To Minimize E. coli Protein Contamination after Purification by Immobilized Metal Affinity Chromatography
Structural analysis and classification of native proteins from E. coli commonly co-purified by immobilised metal affinity chromatography
4楼2014-04-02 10:14:42
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爨乡主人

木虫 (正式写手)

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kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-06-13 09:31:28
我正在做的就是大肠杆菌表达的带His标签的蛋白的纯化,我的结果来看有一个大肠的本底蛋白比我的目的蛋白结合镍柱还牢靠,不知道这个本底蛋白有没有His标签,不过给我纯化带来很大的麻烦。
5楼2014-06-12 19:39:17
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