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大肠杆菌溶菌问题
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wsb0306
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大肠杆菌溶菌问题
大肠杆菌BL21(DE3)最近两个月老是溶菌,溶菌时间不定,发生时间短,起沫,PH上升,菌液发粘,发了好多7L罐子就有几罐好的,现在可以排除试剂和补料的原因,种子也换过不同批次的,镜检也未发现杂菌,怀疑是噬菌体但做噬菌斑实验又没有,不知道为什么希望高手给指教一下。
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2012-05-11 08:12:09
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zhang8826857: 金币+1, 欢迎常来微生物板块交流^_^
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2楼
2012-05-11 09:02:18
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2楼
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Originally posted by
wtaotaoj
at 2012-05-11 09:02:18:
pH上升应该是因为溶菌导致,菌液发粘,应该不是噬菌体,噬菌体溶菌培养基应该会变稀,你这菌是基因工程菌么?感觉像是菌自身的问题啊。
我用的是工程菌,种子应该没问题,我11年做的种子一直用没问题,保存在液氮内的
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3楼
2012-05-12 07:21:14
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2012-05-12 14:38:29
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wtaotaoj
at 2012-05-12 14:38:29:
如果发酵工艺、培养基等一切因素都未改变,原本开始正常,从2个月前突然开始出现的溶菌,考虑是否试剂或原料批次出现问题(淀粉、葡萄糖、酵母粉蛋白胨等或其他原料批次、成分是否有变化?)
镜检无杂菌,可涂板 ...
非常感谢你的分析,我也做了好多试验原料应该没问题,培养基和工艺也没有改变,种子我也做了好多试验也没问题,不知道会不会因为PH值不稳导致部分离子沉淀影响菌体自溶。
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5楼
2012-05-13 20:24:59
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【答案】应助回帖
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这个问题非常麻烦啊,噬菌体双层平板检测没有发现?你可以重复一下,多做几次,应该有的。
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微生物发酵
6楼
2012-05-13 22:19:52
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6楼
:
Originally posted by
hkfgwww
at 2012-05-13 22:19:52:
这个问题非常麻烦啊,噬菌体双层平板检测没有发现?你可以重复一下,多做几次,应该有的。
开始我用正常菌做的没有,后来又用感受态敏感菌做的没有生长,不知道你做噬菌斑实验用什么菌
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2012-05-14 13:36:30
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