24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1717  |  回复: 10

小小乖宝宝

金虫 (正式写手)

[求助] 大肠杆菌O157检测的一些问题

为什么我的检测限做的没有文献报道的那么低?
大肠杆菌O157按照文献灭活之后,文献上说能在冰箱保存2周,然后时间太长就不能用了,是这样的吗?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖置顶 ( 共有1个 )

calise007

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

hsd3521: 应助指数+1 2012-09-07 18:10:28
hsd3521: 回帖置顶 2012-09-07 18:10:31
1.楼主做的O157是做的免疫、还是DNA分子还是做细胞整体检测
2.如果是免疫或DNA分子的,这些标志物只要提取的纯度较好,长时间不用冷冻起来,2周应该还没问题,但是太长时间的话就不好说了。零下85度冻存细胞是最好的,但解冻的时候要注意。已经提取出的分子标志物经常用的话,最好冷藏并且在一星期内用完。检测整体细胞的话,估计有细胞破裂,检测限肯定不好。
3.检测限的问题是多方面的原因,分子标志物提取是一方面,传感器的修饰也是很关键的,总之认真仔细做好每个步骤,把误差降到最低,检测限就将低了。
4楼2012-09-07 09:12:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

诸葛怡琳

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
恩,时间长了,会对他的活性有一定的影响的!!!不过,你最好还是再仔细的重新做一遍吧!!!!
机会留给有准备的人
2楼2012-08-05 10:45:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小乖宝宝

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 诸葛怡琳 at 2012-08-05 10:45:30
恩,时间长了,会对他的活性有一定的影响的!!!不过,你最好还是再仔细的重新做一遍吧!!!!

请问,你也是做这一块的么?
3楼2012-08-28 08:38:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小乖宝宝

金虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by calise007 at 2012-09-07 09:12:04
1.楼主做的O157是做的免疫、还是DNA分子还是做细胞整体检测
2.如果是免疫或DNA分子的,这些标志物只要提取的纯度较好,长时间不用冷冻起来,2周应该还没问题,但是太长时间的话就不好说了。零下85度冻存细胞是最好 ...

我是做免疫检测的!哎,纠结啊
5楼2012-09-09 10:33:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

calise007

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

hsd3521: 应助指数+1 2012-09-11 19:03:36
引用回帖:
5楼: Originally posted by 小小乖宝宝 at 2012-09-09 10:33:37
我是做免疫检测的!哎,纠结啊...

做免疫的话,要注意抗原抗体的活性及孵育时间,另外不能完全按照文献上的去做,要根据自己实验室的条件,具体问题具体分析。
客观因素:实验室的整体条件,比如洁净度、检测环境
主观因素:你所买的试剂的效果,操作过程中的优化实验条件控制,精确到每一个细节上。因为你现在是检测限的问题,而不是能做出来做不出来的问题,所以必须仔细把握好每个操作细节。
6楼2012-09-10 10:21:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小乖宝宝

金虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by calise007 at 2012-09-10 10:21:46
做免疫的话,要注意抗原抗体的活性及孵育时间,另外不能完全按照文献上的去做,要根据自己实验室的条件,具体问题具体分析。
客观因素:实验室的整体条件,比如洁净度、检测环境
主观因素:你所买的试剂的效果, ...

检测菌是把菌灭活之后,然后就可以在室内操作了。哎,不晓得哪里出问题
7楼2012-09-10 18:23:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shenxiaoran

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by calise007 at 2012-09-07 09:12:04
1.楼主做的O157是做的免疫、还是DNA分子还是做细胞整体检测
2.如果是免疫或DNA分子的,这些标志物只要提取的纯度较好,长时间不用冷冻起来,2周应该还没问题,但是太长时间的话就不好说了。零下85度冻存细胞是最好 ...

如果做DNA检测,该如何处理提取到的DNA,使之变成单链并且优先与电极上的探针DNA结合呢?
8楼2012-09-17 15:07:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

calise007

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

hsd3521: 应助指数+1 2012-09-20 20:26:33
引用回帖:
8楼: Originally posted by shenxiaoran at 2012-09-17 15:07:19
如果做DNA检测,该如何处理提取到的DNA,使之变成单链并且优先与电极上的探针DNA结合呢?...

你好,不知道你有生物学背景只知识没有,你所问的问题是分子生物学里面,最基础问题。你看以翻阅一些分子生物学的书本,关于DNA的提取,纯化,解链,杂交等等介绍得很详细。如果楼主实验室不具备生物分子级别,不建议做DNA方面的研究,因为实验室级别要求较高。
9楼2012-09-18 08:47:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

acast

新虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by calise007 at 2012-09-07 09:12:04
1.楼主做的O157是做的免疫、还是DNA分子还是做细胞整体检测
2.如果是免疫或DNA分子的,这些标志物只要提取的纯度较好,长时间不用冷冻起来,2周应该还没问题,但是太长时间的话就不好说了。零下85度冻存细胞是最好 ...

你好  问下整体细胞检测你一般怎么检测啊 我现在从食品中分离出大肠杆菌 但是我不知道怎么检测我分离出来了多少 我不想用微生物的方法检测
"Hope"and"Wait"
10楼2013-03-07 12:14:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小小乖宝宝 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 266求调剂 +29 阳阳哇塞 2026-04-07 29/1450 2026-04-10 16:20 by 高维春
[考研] 298求调剂 +13 钉叮咚冬瓜 2026-04-09 13/650 2026-04-10 15:49 by jiajinhpu
[考研] 材料专硕283求调剂 +18 试试看呗 2026-04-04 19/950 2026-04-10 10:05 by may_新宇
[考研] 一志愿中科大070300化学,314分求调剂 +12 wakeluofu 2026-04-09 12/600 2026-04-10 09:57 by liuhuiying09
[考研] 0854调剂 +7 950824he@ 2026-04-09 7/350 2026-04-10 09:10 by Delta2012
[考研] 一志愿 江南大学 085602 化工专硕 338分求调剂 +16 路痴小琪 2026-04-05 16/800 2026-04-10 08:08 by kangsm
[考研] 本科郑州大学,一志愿华东师范大学282求调剂 +23 熊哥xtk 2026-04-07 26/1300 2026-04-09 17:17 by 18446523
[考研] 化学调剂求助 +14 LULONG1 2026-04-03 19/950 2026-04-09 10:43 by chenxi233
[考研] 材料专硕(0856) 339分求调剂 +16 哈哈哈鹅哈哈哈 2026-04-05 16/800 2026-04-08 16:02 by luoyongfeng
[考研] 338求调剂 +4 我想上岸ii 2026-04-05 4/200 2026-04-06 21:04 by 木子君1218
[考研] 生物与医药求调剂 +7 heguanhua 2026-04-05 8/400 2026-04-06 18:41 by macy2011
[考研] 求助 +3 卡卡东88 2026-04-06 4/200 2026-04-06 15:28 by going home
[考研] 一志愿武汉理工大学080200机械工程308分,求调剂 +4 终不似从前 2026-04-05 4/200 2026-04-06 11:46 by 考研学校招点人
[考研] 第一志愿东南大学物理313,有科研竞赛获奖经历,希望物理复试调剂 +3 马内橙 2026-04-05 3/150 2026-04-06 10:32 by 蓝云思雨
[考研] 化学357分,考研调剂 +11 .Starry. 2026-04-04 12/600 2026-04-06 06:28 by houyaoxu
[考研] 材料专硕322分 +10 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-04 10/500 2026-04-05 21:22 by 学员8dgXkO
[考研] 308求调剂 +3 终不似从前 2026-04-05 3/150 2026-04-05 20:07 by 啵啵啵0119
[考研] 313求调剂 +3 海日海日 2026-04-04 3/150 2026-04-05 07:48 by 544594351
[考研] 能动调剂326专硕 +4 wan112233 2026-04-04 4/200 2026-04-04 22:47 by yu221
[考研] 309求调剂 +4 快乐的小白鸽 2026-04-04 5/250 2026-04-04 15:55 by cql1109
信息提示
请填处理意见