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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 微生物、发酵 » 大肠杆菌O157检测的一些问题
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小小乖宝宝

金虫 (正式写手)

[求助] 大肠杆菌O157检测的一些问题

为什么我的检测限做的没有文献报道的那么低？
大肠杆菌O157按照文献灭活之后，文献上说能在冰箱保存2周，然后时间太长就不能用了，是这样的吗？
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1楼2012-08-05 10:01:06
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回帖置顶 ( 共有1个 )

calise007

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

hsd3521: 应助指数+1 2012-09-07 18:10:28
hsd3521: 回帖置顶 2012-09-07 18:10:31
1.楼主做的O157是做的免疫、还是DNA分子还是做细胞整体检测
2.如果是免疫或DNA分子的，这些标志物只要提取的纯度较好，长时间不用冷冻起来，2周应该还没问题，但是太长时间的话就不好说了。零下85度冻存细胞是最好的，但解冻的时候要注意。已经提取出的分子标志物经常用的话，最好冷藏并且在一星期内用完。检测整体细胞的话，估计有细胞破裂，检测限肯定不好。
3.检测限的问题是多方面的原因，分子标志物提取是一方面，传感器的修饰也是很关键的，总之认真仔细做好每个步骤，把误差降到最低，检测限就将低了。
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4楼2012-09-07 09:12:04
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普通回帖

诸葛怡琳

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
恩，时间长了，会对他的活性有一定的影响的！！！不过，你最好还是再仔细的重新做一遍吧！！！！
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机会留给有准备的人
2楼2012-08-05 10:45:30
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小小乖宝宝

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 诸葛怡琳 at 2012-08-05 10:45:30
恩，时间长了，会对他的活性有一定的影响的！！！不过，你最好还是再仔细的重新做一遍吧！！！！

请问，你也是做这一块的么？
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3楼2012-08-28 08:38:38
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小小乖宝宝

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by calise007 at 2012-09-07 09:12:04
1.楼主做的O157是做的免疫、还是DNA分子还是做细胞整体检测
2.如果是免疫或DNA分子的，这些标志物只要提取的纯度较好，长时间不用冷冻起来，2周应该还没问题，但是太长时间的话就不好说了。零下85度冻存细胞是最好 ...

我是做免疫检测的！哎，纠结啊
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5楼2012-09-09 10:33:37
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calise007

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

hsd3521: 应助指数+1 2012-09-11 19:03:36
引用回帖:
5楼: Originally posted by 小小乖宝宝 at 2012-09-09 10:33:37
我是做免疫检测的！哎，纠结啊...

做免疫的话，要注意抗原抗体的活性及孵育时间，另外不能完全按照文献上的去做，要根据自己实验室的条件，具体问题具体分析。
客观因素：实验室的整体条件，比如洁净度、检测环境
主观因素：你所买的试剂的效果，操作过程中的优化实验条件控制，精确到每一个细节上。因为你现在是检测限的问题，而不是能做出来做不出来的问题，所以必须仔细把握好每个操作细节。
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6楼2012-09-10 10:21:46
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小小乖宝宝

金虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by calise007 at 2012-09-10 10:21:46
做免疫的话，要注意抗原抗体的活性及孵育时间，另外不能完全按照文献上的去做，要根据自己实验室的条件，具体问题具体分析。
客观因素：实验室的整体条件，比如洁净度、检测环境
主观因素：你所买的试剂的效果， ...

检测菌是把菌灭活之后，然后就可以在室内操作了。哎，不晓得哪里出问题
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7楼2012-09-10 18:23:15
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shenxiaoran

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by calise007 at 2012-09-07 09:12:04
1.楼主做的O157是做的免疫、还是DNA分子还是做细胞整体检测
2.如果是免疫或DNA分子的，这些标志物只要提取的纯度较好，长时间不用冷冻起来，2周应该还没问题，但是太长时间的话就不好说了。零下85度冻存细胞是最好 ...

如果做DNA检测，该如何处理提取到的DNA，使之变成单链并且优先与电极上的探针DNA结合呢？
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8楼2012-09-17 15:07:19
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calise007

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

hsd3521: 应助指数+1 2012-09-20 20:26:33
引用回帖:
8楼: Originally posted by shenxiaoran at 2012-09-17 15:07:19
如果做DNA检测，该如何处理提取到的DNA，使之变成单链并且优先与电极上的探针DNA结合呢？...

你好，不知道你有生物学背景只知识没有，你所问的问题是分子生物学里面，最基础问题。你看以翻阅一些分子生物学的书本，关于DNA的提取，纯化，解链，杂交等等介绍得很详细。如果楼主实验室不具备生物分子级别，不建议做DNA方面的研究，因为实验室级别要求较高。
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9楼2012-09-18 08:47:54
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acast

新虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by calise007 at 2012-09-07 09:12:04
1.楼主做的O157是做的免疫、还是DNA分子还是做细胞整体检测
2.如果是免疫或DNA分子的，这些标志物只要提取的纯度较好，长时间不用冷冻起来，2周应该还没问题，但是太长时间的话就不好说了。零下85度冻存细胞是最好 ...

你好  问下整体细胞检测你一般怎么检测啊 我现在从食品中分离出大肠杆菌 但是我不知道怎么检测我分离出来了多少 我不想用微生物的方法检测
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"Hope"and"Wait"
10楼2013-03-07 12:14:03
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