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wsb0306

金虫 (小有名气)

[求助] 大肠杆菌溶菌问题

大肠杆菌BL21(DE3)最近两个月老是溶菌,溶菌时间不定,发生时间短,起沫,PH上升,菌液发粘,发了好多7L罐子就有几罐好的,现在可以排除试剂和补料的原因,种子也换过不同批次的,镜检也未发现杂菌,怀疑是噬菌体但做噬菌斑实验又没有,不知道为什么希望高手给指教一下。
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虫子
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wtaotaoj

禁虫 (小有名气)


感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 欢迎常来微生物板块交流^_^ 2012-05-12 23:39:48
本帖内容被屏蔽

2楼2012-05-11 09:02:18
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wsb0306

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wtaotaoj at 2012-05-11 09:02:18:
pH上升应该是因为溶菌导致,菌液发粘,应该不是噬菌体,噬菌体溶菌培养基应该会变稀,你这菌是基因工程菌么?感觉像是菌自身的问题啊。

我用的是工程菌,种子应该没问题,我11年做的种子一直用没问题,保存在液氮内的
虫子
3楼2012-05-12 07:21:14
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wtaotaoj

禁虫 (小有名气)

★ ★ ★
zhang8826857: 金币+3, 欢迎常来微生物板块交流^_^ 2012-05-12 23:40:07
本帖内容被屏蔽

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2012-05-12 14:38:29
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wsb0306

金虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by wtaotaoj at 2012-05-12 14:38:29:
如果发酵工艺、培养基等一切因素都未改变,原本开始正常,从2个月前突然开始出现的溶菌,考虑是否试剂或原料批次出现问题(淀粉、葡萄糖、酵母粉蛋白胨等或其他原料批次、成分是否有变化?)
镜检无杂菌,可涂板 ...

非常感谢你的分析,我也做了好多试验原料应该没问题,培养基和工艺也没有改变,种子我也做了好多试验也没问题,不知道会不会因为PH值不稳导致部分离子沉淀影响菌体自溶。
虫子
5楼2012-05-13 20:24:59
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hkfgwww

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个问题非常麻烦啊,噬菌体双层平板检测没有发现?你可以重复一下,多做几次,应该有的。
微生物发酵
6楼2012-05-13 22:19:52
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wsb0306

金虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by hkfgwww at 2012-05-13 22:19:52:
这个问题非常麻烦啊,噬菌体双层平板检测没有发现?你可以重复一下,多做几次,应该有的。

开始我用正常菌做的没有,后来又用感受态敏感菌做的没有生长,不知道你做噬菌斑实验用什么菌
虫子
7楼2012-05-14 13:36:30
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fresenius

新虫 (初入文坛)

学习了!
8楼2012-05-14 15:18:49
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