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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 大肠杆菌溶菌问题
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wsb0306

金虫 (小有名气)

[求助] 大肠杆菌溶菌问题

大肠杆菌BL21（DE3)最近两个月老是溶菌，溶菌时间不定，发生时间短，起沫，PH上升，菌液发粘，发了好多7L罐子就有几罐好的，现在可以排除试剂和补料的原因，种子也换过不同批次的，镜检也未发现杂菌，怀疑是噬菌体但做噬菌斑实验又没有，不知道为什么希望高手给指教一下。
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虫子
1楼2012-05-11 08:12:09
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wtaotaoj

禁虫 (小有名气)
★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 欢迎常来微生物板块交流^_^ 2012-05-12 23:39:48
本帖内容被屏蔽
2楼2012-05-11 09:02:18
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wsb0306

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wtaotaoj at 2012-05-11 09:02:18:
pH上升应该是因为溶菌导致，菌液发粘，应该不是噬菌体，噬菌体溶菌培养基应该会变稀，你这菌是基因工程菌么？感觉像是菌自身的问题啊。

我用的是工程菌，种子应该没问题，我11年做的种子一直用没问题，保存在液氮内的
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虫子
3楼2012-05-12 07:21:14
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wtaotaoj

禁虫 (小有名气)
★ ★ ★
zhang8826857: 金币+3, 欢迎常来微生物板块交流^_^ 2012-05-12 23:40:07
本帖内容被屏蔽

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wsb0306
4楼2012-05-12 14:38:29
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wsb0306

金虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by wtaotaoj at 2012-05-12 14:38:29:
如果发酵工艺、培养基等一切因素都未改变，原本开始正常，从2个月前突然开始出现的溶菌，考虑是否试剂或原料批次出现问题（淀粉、葡萄糖、酵母粉蛋白胨等或其他原料批次、成分是否有变化？）
镜检无杂菌，可涂板 ...

非常感谢你的分析，我也做了好多试验原料应该没问题，培养基和工艺也没有改变，种子我也做了好多试验也没问题，不知道会不会因为PH值不稳导致部分离子沉淀影响菌体自溶。
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虫子
5楼2012-05-13 20:24:59
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hkfgwww

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个问题非常麻烦啊，噬菌体双层平板检测没有发现？你可以重复一下，多做几次，应该有的。
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微生物发酵
6楼2012-05-13 22:19:52
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wsb0306

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by hkfgwww at 2012-05-13 22:19:52:
这个问题非常麻烦啊，噬菌体双层平板检测没有发现？你可以重复一下，多做几次，应该有的。

开始我用正常菌做的没有，后来又用感受态敏感菌做的没有生长，不知道你做噬菌斑实验用什么菌
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虫子
7楼2012-05-14 13:36:30
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fresenius

新虫 (初入文坛)
学习了!
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8楼2012-05-14 15:18:49
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