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@木笔@木虫 (小有名气)
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请各位帮忙看下SDS-PAGE胶图。谢谢了。 已有10人参与
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求助各位跑蛋白胶的高手，最近两周跑SDS-PAGE，胶图都是如此。 已经新配了丙稀酰胺和双甲基丙稀酰胺混合液（29：1），10%APS，考马斯亮蓝染色液（不过是用国产的普通滤纸过滤的，以前也是这样，问题并不大），脱色液。 跑浓缩胶的电压是80v，分离胶是100v。 不明白为何胶图还是如此不清晰。染色时间是半小时，脱色一般过夜。请问是什么原因呢？  IMAG0192.jpg |
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liuderong
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考马斯亮蓝如过实验室条件允许，不要重复使用，况且配置很容易，建议自己有一份。 我的实验方式， 考染 5 min- 10 min， 基本可以做到完全染色（一定用首次配置溶液）。 现配脱色液脱色 -- 半小时脱色-- 换脱色液--- 脱色2小时， 这时候基本应该脱色完全，胶应该呈现透明状，如果还有杂背景，继续脱1-2小时。 需要注意的是： 染色液和脱色液均含有易挥发的甲醇和乙酸，一旦放置时间过长，就失去效果。 |
9楼2015-01-29 17:50:18
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