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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请各位帮忙看下SDS-PAGE胶图。谢谢了。
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@木笔@

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by Allen206 at 2015-01-29 14:44:50
浓度不对，用量筒定容，考染时间长点

哪个浓度不对呢？
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做最好的自己！
11楼2015-01-29 19:37:14
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ral_hope

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2015-01-31 22:50:43
一个染色液浓度其实问题不大，时间半小时差不多了，可以用微波炉小火转个5分钟，再接着振摇30分钟，不放心可以1个小时都可以。。
脱色液你查下网络上的配方，醋酸是不是放得太少了，建议重新配一瓶脱色液，如果是重复使用的脱色液，最好都换了，脱色之初，也可以先微波炉转个5分钟，加快速率。。基本上新配制的脱色液。10分钟就能看出效果了。
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@木笔@
12楼2015-01-29 20:13:57
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chichester

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
@木笔@: 金币+2, ★★★很有帮助 2015-01-30 19:34:07
胶的厚度如果是2.5mm的话，染半个小时，脱色一个小时一次换液，连脱三次即可，剩下一次过夜，第二天换液一次，可以得到很好的条带。
你的胶可以看出上样量不均一，可以上样10ul的，配置方法：10ul的样品添加2*的SDS10ul,沸水煮样5分钟后，上样10ul即可。
跑胶浓缩胶80V，分离胶120V都可以的。

Mark上样5ul就可以了，你的胶Mark显示不清
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13楼2015-01-29 20:22:20
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781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
@木笔@: 金币+5, ★有帮助 2015-01-30 19:32:04
楼主保险起见，染二个小时吧，我染过夜从来没出现问题过，脱色的话，自己一个小时下来看一次，直到满意就好。如果还不行，就用别人配的试剂做块胶看看。多换几次，就能做出来了 。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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采菊东篱下，悠然见南山。
14楼2015-01-30 00:49:38
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maila
15楼2015-01-30 08:47:58
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pxq88888

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
@木笔@: 金币+6, ★有帮助 2015-01-30 19:31:34
蛋白加的少吧，或者染色时间过长，我当时也跑的不好，不过有条带，建议买个SDS-page的试剂盒试试，自己配的东西总感觉不好。
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16楼2015-01-30 09:08:12
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luyongchao

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
@木笔@: 金币+2, ★有帮助 2015-01-30 19:31:18
我觉得是脱色液的问题，正常的话，过夜脱色应该是透明的胶才对
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17楼2015-01-30 11:11:05
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@木笔@

木虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by pxq88888 at 2015-01-30 09:08:12
蛋白加的少吧，或者染色时间过长，我当时也跑的不好，不过有条带，建议买个SDS-page的试剂盒试试，自己配的东西总感觉不好。

问题，应该是考马斯亮蓝坏了。我换了瓶，就没有问题了，染得很好。
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做最好的自己！
18楼2015-01-30 19:29:09
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@木笔@

木虫 (小有名气)
引用回帖:
17楼: Originally posted by luyongchao at 2015-01-30 11:11:05
我觉得是脱色液的问题，正常的话，过夜脱色应该是透明的胶才对

是考马斯亮蓝坏了，重新换了瓶配的就 没问题了
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做最好的自己！
19楼2015-01-30 19:31:07
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@木笔@

木虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
12楼: Originally posted by ral_hope at 2015-01-29 20:13:57
一个染色液浓度其实问题不大，时间半小时差不多了，可以用微波炉小火转个5分钟，再接着振摇30分钟，不放心可以1个小时都可以。。
脱色液你查下网络上的配方，醋酸是不是放得太少了，建议重新配一瓶脱色液，如果是重 ...

谢谢您。确实是脱色液的问题，已经换了考马斯亮蓝。没有金币奖励了，送您红花吧。谢谢。
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做最好的自己！
20楼2015-01-30 19:36:00
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