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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请各位帮忙看下SDS-PAGE胶图。谢谢了。
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@木笔@

木虫 (小有名气)

[求助] 请各位帮忙看下SDS-PAGE胶图。谢谢了。 已有10人参与

求助各位跑蛋白胶的高手，最近两周跑SDS-PAGE，胶图都是如此。
已经新配了丙稀酰胺和双甲基丙稀酰胺混合液（29：1），10%APS，考马斯亮蓝染色液（不过是用国产的普通滤纸过滤的，以前也是这样，问题并不大），脱色液。
跑浓缩胶的电压是80v，分离胶是100v。
不明白为何胶图还是如此不清晰。染色时间是半小时，脱色一般过夜。请问是什么原因呢？

请各位帮忙看下SDS-PAGE胶图。谢谢了。
IMAG0192.jpg
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做最好的自己！
1楼 2015-01-29 09:23:32
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@木笔@

木虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by pxq88888 at 2015-01-30 09:08:12
蛋白加的少吧，或者染色时间过长，我当时也跑的不好，不过有条带，建议买个SDS-page的试剂盒试试，自己配的东西总感觉不好。

问题，应该是考马斯亮蓝坏了。我换了瓶，就没有问题了，染得很好。
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做最好的自己！
18楼2015-01-30 19:29:09
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我们飞哈

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-01-30 12:48:04
我们一般都是染色过夜，然后用脱色液脱色，或者用沸水煮。卤煮这个是不是染得不好啊。sds-page做的不多，仅供参考
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2楼2015-01-29 10:21:49
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@木笔@

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 我们飞哈 at 2015-01-29 10:21:49
我们一般都是染色过夜，然后用脱色液脱色，或者用沸水煮。卤煮这个是不是染得不好啊。sds-page做的不多，仅供参考

谢谢您的回复。我也试过染色过夜，然后再脱色的，但是效果依旧不佳。
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做最好的自己！
3楼2015-01-29 10:52:23
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liuderong

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
@木笔@: 金币+5, ★有帮助 2015-01-29 14:47:30
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-01-30 12:48:15
换一个考马斯亮蓝！
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2015-01-29 13:52:07
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