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@木笔@

木虫 (小有名气)

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[求助] 请各位帮忙看下SDS-PAGE胶图。谢谢了。已有10人参与

求助各位跑蛋白胶的高手，最近两周跑SDS-PAGE，胶图都是如此。
已经新配了丙稀酰胺和双甲基丙稀酰胺混合液（29：1），10%APS，考马斯亮蓝染色液（不过是用国产的普通滤纸过滤的，以前也是这样，问题并不大），脱色液。
跑浓缩胶的电压是80v，分离胶是100v。
不明白为何胶图还是如此不清晰。染色时间是半小时，脱色一般过夜。请问是什么原因呢？

IMAG0192.jpg

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做最好的自己！

1楼 2015-01-29 09:23:32

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logowang

铜虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

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@木笔@: 金币+5, ★有帮助 2015-01-29 19:20:26
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-01-30 12:48:34

考马斯亮蓝如过实验室条件允许，不要重复使用，况且配置很容易，建议自己有一份。

我的实验方式，考染 5 min- 10 min，基本可以做到完全染色（一定用首次配置溶液）。现配脱色液脱色 -- 半小时脱色-- 换脱色液--- 脱色2小时，这时候基本应该脱色完全，胶应该呈现透明状，如果还有杂背景，继续脱1-2小时。

需要注意的是：染色液和脱色液均含有易挥发的甲醇和乙酸，一旦放置时间过长，就失去效果。