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一个基因的cDNA与gDNA 序列有没有可能是完全一样的
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peace12039088
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一个基因的cDNA与gDNA 序列有没有可能是完全一样的
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1kb之内的基因的cDNA 与gDNA序列会是完全一致的吗?
例如,基于RT-PCR、PCR分别扩增cDNA/gDNA,测序表明二者序列一致,能就此认为该基因的cDNA/gDNA是完全一致的吗?
望各位资深同行不吝赐教。
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1楼
2015-01-26 11:29:31
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peace12039088
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2楼
:
Originally posted by
liuderong
at 2015-01-26 12:03:00
完全一样还是有的。细菌的基因没有内含子,全都是一样的
我的研究对象是大田农作物。
按照你的意思,若无内含子,就是一样的?
即用同样的引物进行RT-PCR或PCR,得到是序列一致的话,说明是无内含子的,所以cDNA、gDNA是一样的/
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3楼
2015-01-26 14:58:32
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完全一样还是有的。细菌的基因没有内含子,全都是一样的
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2楼
2015-01-26 12:03:00
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3楼
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Originally posted by
peace12039088
at 2015-01-26 14:58:32
我的研究对象是大田农作物。
按照你的意思,若无内含子,就是一样的?
即用同样的引物进行RT-PCR或PCR,得到是序列一致的话,说明是无内含子的,所以cDNA、gDNA是一样的/...
要用扩增全长的引物把cDNA扩增出来才能确定,要是RT-PCR和PCR引物都是扩增其中一个外显子就说明不了。
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4楼
2015-01-26 20:06:30
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2015-02-11 10:27:48
(1)有可能是你的cDNA有gDNA的污染,但一般这种情况你会得到多条带,你应该能注意到。
假设没有污染:
(2)假设你扩的是gene全长,那么你的基因就有可能没有内含子,只有外显子。
(3)如果你扩的只是一部分gene序列,那么就很有可能你刚刚扩出来了同一个外显子片段的序列
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5楼
2015-01-27 05:53:33
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