[交流] 转基因拟南芥转的是基因全长？cDNA全长还是CDS全长？

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1楼2013-11-27 10:32:54

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三蛰

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哥们，我只能说你对很多概念还不清楚。

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4楼2013-11-27 14:04:53

grape_vine

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确实问的比较笼统,转基因是个过程,要看你目的是什么？除了35s过表达，本身启动子+编码区的构建，还有反义，RNAi，人工microRNA等等很多，不同的目的所用到的序列都不尽相同，所以。。。。。。

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8楼2013-11-27 23:00:59

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gyesang

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直接克隆CDS构建过表达载体就可以了

2楼2013-11-27 12:43:24

jinwei331

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5楼2013-11-27 15:30:01

fanwq258

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2楼: Originally posted by gyesang at 2013-11-27 12:43:24
直接克隆CDS构建过表达载体就可以了

其他物种的基因，不用cDNA全长吗？

6楼2013-11-27 16:21:53

fanwq258

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4楼: Originally posted by 三蛰 at 2013-11-27 14:04:53
哥们，我只能说你对很多概念还不清楚。

那你给解释下？

7楼2013-11-27 16:22:40

匿名

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9楼2013-11-28 22:13:25

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laojiu9878

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孺子还需努力，基础理论加强

10楼2013-11-29 16:21:36

fanwq258

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10楼: Originally posted by laojiu9878 at 2013-11-29 16:21:36
孺子还需努力，基础理论加强

我知道一般的研究就CDS够了，但是我还看到过以基因组为模版的，外显子，内含子都要还要5`3`端几KB的序列

11楼2013-11-29 19:55:30

夜舞龙

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看你的意思是要把一个完整的外源基因在拟南芥中进行表达，如果用其它的启动子，例如35s，一般来说，转入CDS，即包括完整的阅读框就可以了。
如果是用自己的启动子，当然一般直接用基因组全长。
如果这个基因可能存在不同的剪切版本，那么转入基因组全长可能结果更可靠一些，或者将不同剪切的版本都转入。
我们老板美国的老板说他们有一个基因（拟南芥基因转入拟南芥）用CDS没有现象，而换成基因组全长后就有了现象，他猜测剪切可能和最后的功能也有关系。但是我们实验室这么多年还没有遇到这样的情况，应该很少见。
我们老板在比较纠结的时候会让把两个都做上，呵呵。

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12楼2013-11-29 21:00:54