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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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faile18

金虫 (小有名气)

[求助] 酵母质粒转入大肠杆菌后PCR无法检测到 已有1人参与

如题,酵母双杂交筛选到阳性克隆后,提取质粒转化商品化的大肠杆菌感受态,可以在抗性培养基上正常生长,但菌液PCR无法检测,长出的克隆在液体培养基中也无法扩繁。请教原因是什么,该如何解决。感激!
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titus0805

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2015-01-21 21:22:24
确定质粒有没有原核的ori位点,没有的话就不能转大肠杆菌
2楼2015-01-20 09:57:47
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kingjazz23

金虫 (小有名气)

楼主 你好 我想问问你是用什么方法提取酵母的质粒的 我最近在做这个实验 一直没做出来

发自小木虫IOS客户端
3楼2017-07-24 18:46:02
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faile18

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by kingjazz23 at 2017-07-24 18:46:02
楼主 你好 我想问问你是用什么方法提取酵母的质粒的 我最近在做这个实验 一直没做出来

我们用的是公司的试剂盒提的,酵母高纯度质粒小量快速提取试剂盒
4楼2017-07-24 19:14:58
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狗屎运

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by faile18 at 2017-07-24 19:14:58
我们用的是公司的试剂盒提的,酵母高纯度质粒小量快速提取试剂盒...

你好,我想问一下,你们提取的质粒浓度大不大啊,为什么我用天根的试剂盒提出来的酵母质粒浓度都特别小,基本都是10ng/μL一下。

发自小木虫Android客户端
5楼2017-09-06 09:31:13
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