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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 单链DNA和质粒转化大肠杆菌DH5α谁的转化效率高？
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echochen1017

新虫 (初入文坛)

[求助] 单链DNA和质粒转化大肠杆菌DH5α谁的转化效率高？

将质粒线性化后转化入大肠杆菌DH5α的效率是多少呢？有相关文献或资料最好！和环状质粒的转化效率相比呢？
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1楼 2013-07-17 14:05:15
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huanghznd

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-07-21 08:17:34
如果转入大肠杆菌的质粒不是为了整合到基因组中，也没有必要线性化吧？现在把质粒转入大肠杆菌很容易的，有电转，也有钙转，都很方便。其中电转有10的7个方这样
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2楼2013-07-17 14:27:47
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echochen1017

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by huanghznd at 2013-07-17 14:27:47
如果转入大肠杆菌的质粒不是为了整合到基因组中，也没有必要线性化吧？现在把质粒转入大肠杆菌很容易的，有电转，也有钙转，都很方便。其中电转有10的7个方这样

我只是想知道这两个比较，那个转化更容易一些，具体数据是多少？原因是什么？
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3楼2013-07-17 14:30:42
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Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
echochen1017: 金币+1, ★有帮助 2013-07-17 21:50:37
线性大概是超螺旋的1/1000
sigma这写得是<0.01 http://www.sigmaaldrich.com/life ... ion-efficiency.html
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4楼2013-07-17 21:41:53
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-07-21 08:17:41
引用回帖:
3楼: Originally posted by echochen1017 at 2013-07-17 14:30:42
我只是想知道这两个比较，那个转化更容易一些，具体数据是多少？原因是什么？...

具体数据要看转化的方法和所用的感受态细胞了。就一般而言，当然是超螺旋质粒的转换效率高很多，一般热激也质粒用量在pg数量级，线性化的DNA要用ng级的。
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5楼2013-07-18 01:52:11
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echochen1017

新虫 (初入文坛)
我用的化转，算了下，模板在PCR终产物里的含量是1%，这也会在转化的时候占优势而导致都是模板转入吗？
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6楼2013-07-18 10:18:27
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