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echochen1017

新虫 (初入文坛)

[求助] 单链DNA和质粒转化大肠杆菌DH5α谁的转化效率高?

将质粒线性化后转化入大肠杆菌DH5α的效率是多少呢?有相关文献或资料最好!和环状质粒的转化效率相比呢?
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huanghznd

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-07-21 08:17:34
如果转入大肠杆菌的质粒不是为了整合到基因组中,也没有必要线性化吧?现在把质粒转入大肠杆菌很容易的,有电转,也有钙转,都很方便。其中电转有10的7个方这样
2楼2013-07-17 14:27:47
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echochen1017

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by huanghznd at 2013-07-17 14:27:47
如果转入大肠杆菌的质粒不是为了整合到基因组中,也没有必要线性化吧?现在把质粒转入大肠杆菌很容易的,有电转,也有钙转,都很方便。其中电转有10的7个方这样

我只是想知道这两个比较,那个转化更容易一些,具体数据是多少?原因是什么?
3楼2013-07-17 14:30:42
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Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
echochen1017: 金币+1, 有帮助 2013-07-17 21:50:37
线性大概是超螺旋的1/1000
sigma这写得是<0.01 http://www.sigmaaldrich.com/life ... ion-efficiency.html
4楼2013-07-17 21:41:53
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-07-21 08:17:41
引用回帖:
3楼: Originally posted by echochen1017 at 2013-07-17 14:30:42
我只是想知道这两个比较,那个转化更容易一些,具体数据是多少?原因是什么?...

具体数据要看转化的方法和所用的感受态细胞了。就一般而言,当然是超螺旋质粒的转换效率高很多,一般热激也质粒用量在pg数量级,线性化的DNA要用ng级的。
5楼2013-07-18 01:52:11
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echochen1017

新虫 (初入文坛)

我用的化转,算了下,模板在PCR终产物里的含量是1%,这也会在转化的时候占优势而导致都是模板转入吗?
6楼2013-07-18 10:18:27
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