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东方亦雪

铁虫 (初入文坛)

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[求助] 常规PCR条带很亮，荧光定量pcr无扩增曲线求解！已有2人参与

下附图片：pcr电泳图，RT-PCR程序和扩增曲线，17模板浓度最高扩增条带未达到平台期，下面六个梯度无扩增条带,不知道是什么原因，求指教！

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1楼 2015-01-19 17:06:10

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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

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【答案】应助回帖

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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-01-19 19:03:10

常规PCR的条带也不是很亮啊？marker也一般，偏暗（不知道是不是胶的原因）。没有扩增产物可能是酶的特异性太差http://www.detaibio.com/relia-hotstart-polymerase.html，或者是引物设计的不合适，没有扩增出条带，荧光定量PCR时的模板浓度也考虑一下，各方面分析。