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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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guyue900905

新虫 (初入文坛)

[求助] 怎么选择合适的酶切位点和载体 已有2人参与

在设计引物的时候怎么选择合适的酶切位点?
在DNA重组的过程中,怎么选择合适的载体?
谢谢高手~~~
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红卫大兵

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
其实很简单就是选择载体上有的并且基因上没有的,而且上酶切位点两个不能在一起,中间要有别的酶切位点
3楼2015-01-15 19:22:22
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晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2015-01-15 18:13:54
酶切位点的选择,一般根据你目的基因序列和载体的要求来选择。常规的,想要获得全长的目的基因序列并转化连接,必须选择目的基因序列内没有的酶切位点,否则目的基因就会被切断。另外,需要选择表达载体上的多克隆位点有的酶切位点,否则你无法连接到目的表达载体上。
载体的选择则是需要根据你实验的需要了。
2楼2015-01-15 10:27:01
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guyue900905

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 红卫大兵 at 2015-01-15 19:22:22
其实很简单就是选择载体上有的并且基因上没有的,而且上酶切位点两个不能在一起,中间要有别的酶切位点

你好  我想再问一下我提取的DNA显示有RNA的污染,对后续想要做的蛋白表达有影响么?
谢谢
4楼2015-01-21 10:26:28
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杨仔儿

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-01-15 10:27:01
酶切位点的选择,一般根据你目的基因序列和载体的要求来选择。常规的,想要获得全长的目的基因序列并转化连接,必须选择目的基因序列内没有的酶切位点,否则目的基因就会被切断。另外,需要选择表达载体上的多克隆位 ...

我现在做的实验是:我已经知道载体上的酶切位点了,但是我怎么确定目的基因上没有酶切位点呢?
5楼2015-05-14 08:10:04
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