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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 怎么选择合适的酶切位点和载体
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guyue900905

新虫 (初入文坛)

[求助] 怎么选择合适的酶切位点和载体 已有2人参与

在设计引物的时候怎么选择合适的酶切位点？
在DNA重组的过程中，怎么选择合适的载体？
谢谢高手~~~
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1楼 2015-01-15 09:02:01
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晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-01-15 18:13:54
酶切位点的选择，一般根据你目的基因序列和载体的要求来选择。常规的，想要获得全长的目的基因序列并转化连接，必须选择目的基因序列内没有的酶切位点，否则目的基因就会被切断。另外，需要选择表达载体上的多克隆位点有的酶切位点，否则你无法连接到目的表达载体上。
载体的选择则是需要根据你实验的需要了。
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2楼2015-01-15 10:27:01
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红卫大兵

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
其实很简单就是选择载体上有的并且基因上没有的，而且上酶切位点两个不能在一起，中间要有别的酶切位点
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3楼2015-01-15 19:22:22
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guyue900905

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 红卫大兵 at 2015-01-15 19:22:22
其实很简单就是选择载体上有的并且基因上没有的，而且上酶切位点两个不能在一起，中间要有别的酶切位点

你好  我想再问一下我提取的DNA显示有RNA的污染，对后续想要做的蛋白表达有影响么？
谢谢
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4楼2015-01-21 10:26:28
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杨仔儿

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-01-15 10:27:01
酶切位点的选择，一般根据你目的基因序列和载体的要求来选择。常规的，想要获得全长的目的基因序列并转化连接，必须选择目的基因序列内没有的酶切位点，否则目的基因就会被切断。另外，需要选择表达载体上的多克隆位 ...

我现在做的实验是：我已经知道载体上的酶切位点了，但是我怎么确定目的基因上没有酶切位点呢？
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5楼2015-05-14 08:10:04
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kingjazz23

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-01-15 10:27:01
酶切位点的选择，一般根据你目的基因序列和载体的要求来选择。常规的，想要获得全长的目的基因序列并转化连接，必须选择目的基因序列内没有的酶切位点，否则目的基因就会被切断。另外，需要选择表达载体上的多克隆位 ...

我想问问做真核表达的话，要怎样选择合适的载体？就是有没有什么具体的比较，哪种载体比较好？因为也是刚刚研一，之前没有涉及过，所以想请教一下你
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6楼2015-12-14 11:12:00
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