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zhaoyu2881木虫 (正式写手)
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基因插入突变的一点疑惑？
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第一次着手做插入突变，打算将目的基因（~1kb）插入到质粒pBS的MCS中，然后插入抗性基因使其失活。现在有个疑惑，所要插入的目的基因需要是全长吗，还是基因的一部分也可以？现用实验室现有的引物扩增出大概850-900bp的片段，我不知道是否需要重新设计引物扩出全长，然后再做插入突变？ 第一次做insertion mutant，不是很懂，希望有经验的虫虫们不吝指教~~谢谢！ |
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【答案】应助回帖
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zhaoyu2881: 金币+6, ★★★很有帮助, 哦，这样啊，我大概明白你的意思了，我自己再思考一下。恩，你要有空的话，还烦请你给我画个图，留个我的邮箱吧luochai@163.com，真是很感谢你！ 2012-09-29 09:47:13
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-09-29 14:42:04
zhaoyu2881: 金币+6, ★★★很有帮助, 哦，这样啊，我大概明白你的意思了，我自己再思考一下。恩，你要有空的话，还烦请你给我画个图，留个我的邮箱吧luochai@163.com，真是很感谢你！ 2012-09-29 09:47:13
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-09-29 14:42:04
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这个不会呀。因为你是通过同源重组进行双交换，从而使目的基因失活的。你没P的那部分还是野生宿主基因组的，你P的那部分相当于一个平台，把抗性基因引入野生基因从而达到失活的目的。不知道这样说你是不是明白了。实在不明白等我有空画个图给你，最近实在事情太多。 |
6楼2012-09-29 08:45:49
| 祝福 祝福 |
7楼2012-09-29 09:07:07
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