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sophia_p

新虫 (初入文坛)

[交流] 荧光定量PCR可以直接用提取的基因组DNA作为模板吗? 已有3人参与

还有做绝对定量的时候可以不用做内参基因吧?直接做质粒的标准曲线和样品的标准曲线就可以了吗?
因为刚接触这个,还有点不太明白,求大神解答!
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biot

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以的,你做的是DNA的定量,这样做没有问题。你用质粒作为标准品做标准曲线,最后可以换算出来拷贝数,这是绝对定量。
如果是做转录,表达量的变化,需要提取RNA,反转录为cDNA,然后再做相对定量。
扬帆起航!
4楼2015-01-15 09:22:10
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红卫大兵

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
当然不可以啊。得用cdna
2楼2015-01-13 21:16:33
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sophia_p

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 红卫大兵 at 2015-01-13 21:16:33
当然不可以啊。得用cdna

但是我网上查了下,有的人说又可以。只是基因组DNA里面多了内含子而已啊。
3楼2015-01-14 14:34:40
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sophia_p

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by biot at 2015-01-15 09:22:10
可以的,你做的是DNA的定量,这样做没有问题。你用质粒作为标准品做标准曲线,最后可以换算出来拷贝数,这是绝对定量。
如果是做转录,表达量的变化,需要提取RNA,反转录为cDNA,然后再做相对定量。

谢谢!知道了!
5楼2015-01-15 18:17:49
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