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sophia_p

新虫 (初入文坛)

[交流] 多重PCR产物纯化回收后可以直接拿去测序吗? 已有2人参与

我看网上有人说PCR产物测序必须是单一的条带?
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ptttmt

银虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2015-01-08 16:30:35
可以,比如5重PCR,出来5个特异条带,你测序的时候,如果是要全部测序,就送5个对应引物,测5个反应,每个反应只能用一个对应引物,而且纯化的时候,用pH9.0的ddH2O洗脱,在测序单上注明多重PCR产物已纯化。
2楼2015-01-07 22:55:26
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键盘上的脚丫

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by ptttmt at 2015-01-07 22:55:26
可以,比如5重PCR,出来5个特异条带,你测序的时候,如果是要全部测序,就送5个对应引物,测5个反应,每个反应只能用一个对应引物,而且纯化的时候,用pH9.0的ddH2O洗脱,在测序单上注明多重PCR产物已纯化。

其实可以多做一步,切胶回收。把目的片段找出来,或者是分别测序,这样会效果更好,这是我的理解
3楼2015-01-08 16:51:31
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sophia_p

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ptttmt at 2015-01-07 22:55:26
可以,比如5重PCR,出来5个特异条带,你测序的时候,如果是要全部测序,就送5个对应引物,测5个反应,每个反应只能用一个对应引物,而且纯化的时候,用pH9.0的ddH2O洗脱,在测序单上注明多重PCR产物已纯化。

谢谢!懂了!
4楼2015-01-13 19:23:16
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