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DNA提纯遇到的问题已有1人参与
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本人第一次接触分子实验,现在在做提取菌株的DNA的实验。采用了CTAB法提取菌丝的DNA,操作步骤完全按照CTAB法进行,但是提取DNA之后用loading buffer 跑电泳检测DNA的纯度,发现①电泳图DNA是两条带,这是因为DNA断裂了还是DNA中有杂质呢? ②DNA中的杂质(蛋白质或RNA)该如何去除呢?具体步骤是什么呢? ③如果将提取的DNA保存在-20度冰箱里一周之后,再使用时发现DNA不纯,现在还能加入RNA酶或蛋白酶吗?那么具体加入这两种酶的步骤是什么呢? ④DNA的OD260/280的值在1.8-2.0之间时,跑ITS-PCR后电泳发现条带不太清纯,有些有拖尾现象,有些隐约是两条带,这又是为什么呢? 我做了两个月的实验了,但是还是找不到解决DNA纯度的办法,恳请各位大师帮我解决这四个问题,感激不尽啊!!! |
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