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kdliming

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[交流] p43启动子在大肠杆菌中也能启动基因的转录吗已有4人参与

p43启动子是来源于枯草芽孢杆菌的启动子，在大肠杆菌中能启动基因的转录吗

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1楼 2014-12-21 13:38:46

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ls2046

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kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-12-22 15:53:19

p43和pQ差不多，pQ既然可以，p43应该也是可以的。
参见江南大学硕士论文：《新型启动子PQ介导高温a-淀粉酶表达的研究》，作者佟小雪

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一品黄山

2楼2014-12-22 08:52:47

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bolysu

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3楼2014-12-22 10:16:58

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kdliming

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3楼: Originally posted by bolysu at 2014-12-22 10:16:58
我很快就会有一篇关于这个的文章，分析的很详细。先透露下，确实是可以的

谢谢。那么P43启动子的强度与T7启动子比，谁强？还有，在大肠中还是组成型表达吗？我碰到的问题是，我在pWB980中插入了一个大肠杆菌的的Ori和Amp抗性基因，构建成大肠-枯草的穿梭表达载体，这个载体连上目的基因后转化大肠，筛选出含有目的基因的重组载体(经过测序证明是正确的)，但这个载体不能被EcoR I、BamH I 和Hind III 切开（我就是用这些进行酶切连接构建的重组载体）。我怀疑是目的基因表达引起的，因此才有P43启动子是否能做大肠杆菌中启动基因表达的问题。这个目的基因是个磺基转移酶基因，并不是什么甲基化酶，它是怎样引起重组载体不能被限制酶切开的呢？还有，这个重组载体始终没法转化到枯草中去，但是穿梭载体可以，我不知道是目的基因有细胞毒性还他可以是卡那霉素（枯草阳性筛选基因）失活。能否谈谈你的看法，还有，能否把你的论文先给我看看，看看你的分析，谢谢

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4楼2015-01-03 03:51:16

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