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李宜鸿17

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助带有CMV启动子的eGFP质粒 已有1人参与

亲们，求助带有CMV启动子的eGFP质粒，或是其他携带真核启动子eGFP的质粒都可以的，只要转入细胞能成功复制即可，现在想要做一些这方面的实验，希望有好心人能帮忙，也可以交换的，可以交流下看是否有需要的，不胜感激，我Q 272034216.谢谢，祝大家科研顺利，马上有paper。
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1楼 2014-11-10 09:11:15
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fitgene

银虫 (著名写手)

辉骏生物

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
李宜鸿17: 金币+5, ★有帮助, 谢谢啊，不过因为是我自己想做这个东西，经费不予支持，所以想求一下。不过还是很感谢你！ 2014-11-11 08:53:30
这种情况一般很少有人会给出的，都是自己实验室做出的东西，你还不如来公司买，或者构建，也不需要花太多钱的，希望帮助LZ,
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2楼2014-11-10 09:45:47
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李宜鸿17

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fitgene at 2014-11-10 09:45:47
这种情况一般很少有人会给出的，都是自己实验室做出的东西，你还不如来公司买，或者构建，也不需要花太多钱的，希望帮助LZ,

还想再请教一个问题哦，这种带有CMV启动子的质粒可以在大肠杆菌里面进行扩增么，谢谢，需要有什么注意事项么
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3楼2014-11-12 08:36:50
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fitgene

银虫 (著名写手)

辉骏生物

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
李宜鸿17: 金币+5, ★有帮助 2014-11-12 12:05:53
引用回帖:
3楼: Originally posted by 李宜鸿17 at 2014-11-12 08:36:50
还想再请教一个问题哦，这种带有CMV启动子的质粒可以在大肠杆菌里面进行扩增么，谢谢，需要有什么注意事项么...

CMV启动子一般用于真核表达载体，你所问道的这个启动子能否在原核大肠杆菌中表达，这是两个不对应的概念，因为扩增与复制子有关，启动子和转录有关，所以你需要分清楚两个不同的概念，然后在想想你想问的是什么
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4楼2014-11-12 09:56:37
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李宜鸿17

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by fitgene at 2014-11-12 09:56:37
CMV启动子一般用于真核表达载体，你所问道的这个启动子能否在原核大肠杆菌中表达，这是两个不对应的概念，因为扩增与复制子有关，启动子和转录有关，所以你需要分清楚两个不同的概念，然后在想想你想问的是什么:ha ...

很抱歉没有表达清楚我得意思，耽误您的时间了，是这样的，我已经要到了一个携带CMV启动子的peGFP质粒，而我现在是要做基因转染，想把这个质粒转到细胞里面，所以我想先把这个质粒扩增一下，不知道这个质粒是否能转到E.coli宿主菌里面进行复制，因为我看文献里面是转到DH5α后进行扩增的，之前没做过这方面的实验，很多东西都不太明白，忘不吝赐教，非常感谢！
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5楼2014-11-12 11:18:59
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lucious

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 李宜鸿17 at 2014-11-12 11:18:59
很抱歉没有表达清楚我得意思，耽误您的时间了，是这样的，我已经要到了一个携带CMV启动子的peGFP质粒，而我现在是要做基因转染，想把这个质粒转到细胞里面，所以我想先把这个质粒扩增一下，不知道这个质粒是否能转 ...

可以，按说明书做就可以，也可以上网查一下，很多种方法
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好好学习
6楼2014-12-01 22:30:39
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