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李宜鸿17

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助带有CMV启动子的eGFP质粒 已有1人参与

亲们,求助带有CMV启动子的eGFP质粒,或是其他携带真核启动子eGFP的质粒都可以的,只要转入细胞能成功复制即可,现在想要做一些这方面的实验,希望有好心人能帮忙,也可以交换的,可以交流下看是否有需要的,不胜感激,我Q 272034216.谢谢,祝大家科研顺利,马上有paper。
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fitgene

银虫 (著名写手)

辉骏生物


【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
李宜鸿17: 金币+5, 有帮助, 谢谢啊,不过因为是我自己想做这个东西,经费不予支持,所以想求一下。不过还是很感谢你! 2014-11-11 08:53:30
这种情况一般很少有人会给出的,都是自己实验室做出的东西,你还不如来公司买,或者构建,也不需要花太多钱的,希望帮助LZ,
2楼2014-11-10 09:45:47
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李宜鸿17

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by fitgene at 2014-11-10 09:45:47
这种情况一般很少有人会给出的,都是自己实验室做出的东西,你还不如来公司买,或者构建,也不需要花太多钱的,希望帮助LZ,

还想再请教一个问题哦,这种带有CMV启动子的质粒可以在大肠杆菌里面进行扩增么,谢谢,需要有什么注意事项么
3楼2014-11-12 08:36:50
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fitgene

银虫 (著名写手)

辉骏生物


【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
李宜鸿17: 金币+5, 有帮助 2014-11-12 12:05:53
引用回帖:
3楼: Originally posted by 李宜鸿17 at 2014-11-12 08:36:50
还想再请教一个问题哦,这种带有CMV启动子的质粒可以在大肠杆菌里面进行扩增么,谢谢,需要有什么注意事项么...

CMV启动子一般用于真核表达载体,你所问道的这个启动子能否在原核大肠杆菌中表达,这是两个不对应的概念,因为扩增与复制子有关,启动子和转录有关,所以你需要分清楚两个不同的概念,然后在想想你想问的是什么
4楼2014-11-12 09:56:37
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李宜鸿17

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by fitgene at 2014-11-12 09:56:37
CMV启动子一般用于真核表达载体,你所问道的这个启动子能否在原核大肠杆菌中表达,这是两个不对应的概念,因为扩增与复制子有关,启动子和转录有关,所以你需要分清楚两个不同的概念,然后在想想你想问的是什么:ha ...

很抱歉没有表达清楚我得意思,耽误您的时间了,是这样的,我已经要到了一个携带CMV启动子的peGFP质粒,而我现在是要做基因转染,想把这个质粒转到细胞里面,所以我想先把这个质粒扩增一下,不知道这个质粒是否能转到E.coli宿主菌里面进行复制,因为我看文献里面是转到DH5α后进行扩增的,之前没做过这方面的实验,很多东西都不太明白,忘不吝赐教,非常感谢!
5楼2014-11-12 11:18:59
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lucious

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 李宜鸿17 at 2014-11-12 11:18:59
很抱歉没有表达清楚我得意思,耽误您的时间了,是这样的,我已经要到了一个携带CMV启动子的peGFP质粒,而我现在是要做基因转染,想把这个质粒转到细胞里面,所以我想先把这个质粒扩增一下,不知道这个质粒是否能转 ...

可以,按说明书做就可以,也可以上网查一下,很多种方法
好好学习
6楼2014-12-01 22:30:39
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