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melisax

新虫 (初入文坛)

[求助] ptac启动子能否在宿主大肠杆菌w3110中被诱导表达? 已有1人参与

最近在构建表达载体,希望在w3110宿主中被诱导表达,实验室有带ptac这个启动子的pet系列载体,我能用这个现成的继续构建表达载体么?如果不行还有什么可以被诱导表达的载体呢?急求答案!!!!谢谢大家!!!!!!!

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Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励应助! 2013-04-22 17:32:22
你载体上自带lacI的话就可以

pTac用得是sigma 70,啥大肠杆菌理论上都可以。。
3楼2013-04-22 10:09:03
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melisax

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by Haibara_Ai at 2013-04-22 10:11:25
另外W3110没有额外的基因修饰,和MG1655都可算是“野生型”
所以基因组里面只有一个copy的原始lacI,那个无法完全抑制表达。

什么意思?不太明白?是说不会被抑制表达的意思么?

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6楼2013-04-22 10:12:46
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普通回帖

melisax

新虫 (初入文坛)

在线等答案啊!!!!!急!!!!!

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2楼2013-04-22 10:03:42
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melisax

新虫 (初入文坛)

载体上有lacI,能用就好!谢谢!!!!

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4楼2013-04-22 10:11:21
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Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-04-22 17:33:29
另外W3110没有额外的基因修饰,和MG1655都可算是“野生型”
所以基因组里面只有一个copy的原始lacI,那个无法完全抑制表达。
5楼2013-04-22 10:11:25
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Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)

我是在你回上个帖子前回的
只是补充说明
7楼2013-04-22 10:14:08
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melisax

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by Haibara_Ai at 2013-04-22 10:14:08
我是在你回上个帖子前回的
只是补充说明

哦,好的,谢谢你啦!

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
8楼2013-04-22 10:14:58
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zhenwuhuang

至尊木虫 (文学泰斗)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
大家貌似都以大肠杆菌DH5α为宿主菌
9楼2013-04-22 10:37:43
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Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)


melisax(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,鼓励应助,分子生物版块期待你的更多精彩。 2013-04-24 08:42:54
DH5 alpha是用来clone的,突变太多,生长很不健康,不适合做功能研究或者其他目的

DH5α genotype
F- endA1 glnV44 thi-1 recA1 relA1 gyrA96 deoR nupG Φ80dlacZΔM15 Δ(lacZYA-argF)U169, hsdR17(rK- mK+), λ–
10楼2013-04-22 11:03:03
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