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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » ptac启动子能否在宿主大肠杆菌w3110中被诱导表达？
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melisax

新虫 (初入文坛)

[求助] ptac启动子能否在宿主大肠杆菌w3110中被诱导表达？ 已有1人参与

最近在构建表达载体，希望在w3110宿主中被诱导表达，实验室有带ptac这个启动子的pet系列载体，我能用这个现成的继续构建表达载体么？如果不行还有什么可以被诱导表达的载体呢？急求答案！！！！谢谢大家！！！！！！！

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1楼 2013-04-22 10:01:12
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Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励应助！ 2013-04-22 17:32:22
你载体上自带lacI的话就可以

pTac用得是sigma 70，啥大肠杆菌理论上都可以。。
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3楼2013-04-22 10:09:03
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melisax

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by Haibara_Ai at 2013-04-22 10:11:25
另外W3110没有额外的基因修饰，和MG1655都可算是“野生型”
所以基因组里面只有一个copy的原始lacI，那个无法完全抑制表达。

什么意思？不太明白？是说不会被抑制表达的意思么？

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6楼2013-04-22 10:12:46
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普通回帖

melisax

新虫 (初入文坛)
在线等答案啊！！！！！急！！！！！

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2楼2013-04-22 10:03:42
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melisax

新虫 (初入文坛)
载体上有lacI，能用就好！谢谢！！！！

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4楼2013-04-22 10:11:21
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Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-04-22 17:33:29
另外W3110没有额外的基因修饰，和MG1655都可算是“野生型”
所以基因组里面只有一个copy的原始lacI，那个无法完全抑制表达。
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5楼2013-04-22 10:11:25
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Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)
我是在你回上个帖子前回的
只是补充说明
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7楼2013-04-22 10:14:08
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melisax

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by Haibara_Ai at 2013-04-22 10:14:08
我是在你回上个帖子前回的
只是补充说明

哦，好的，谢谢你啦！

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8楼2013-04-22 10:14:58
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zhenwuhuang

至尊木虫 (文学泰斗)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
大家貌似都以大肠杆菌DH5α为宿主菌
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9楼2013-04-22 10:37:43
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Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)
★
melisax(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，鼓励应助，分子生物版块期待你的更多精彩。 2013-04-24 08:42:54
DH5 alpha是用来clone的，突变太多，生长很不健康，不适合做功能研究或者其他目的

DH5α genotype
F- endA1 glnV44 thi-1 recA1 relA1 gyrA96 deoR nupG Φ80dlacZΔM15 Δ(lacZYA-argF)U169, hsdR17(rK- mK+), λ–
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10楼2013-04-22 11:03:03
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