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kdliming

新虫 (小有名气)

[交流] p43启动子在大肠杆菌中也能启动基因的转录吗 已有4人参与

p43启动子是来源于枯草芽孢杆菌的启动子,在大肠杆菌中能启动基因的转录吗
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kdliming

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by bolysu at 2014-12-22 10:16:58
我很快就会有一篇关于这个的文章,分析的很详细。先透露下,确实是可以的

谢谢。那么P43启动子的强度与T7启动子比,谁强?还有,在大肠中还是组成型表达吗?我碰到的问题是,我在pWB980中插入了一个大肠杆菌的的Ori和Amp抗性基因,构建成大肠-枯草的穿梭表达载体,这个载体连上目的基因后转化大肠,筛选出含有目的基因的重组载体(经过测序证明是正确的),但这个载体不能被EcoR I、BamH I 和Hind III 切开(我就是用这些进行酶切连接构建的重组载体)。我怀疑是目的基因表达引起的,因此才有P43启动子是否能做大肠杆菌中启动基因表达的问题。这个目的基因是个磺基转移酶基因,并不是什么甲基化酶,它是怎样引起重组载体不能被限制酶切开的呢?还有,这个重组载体始终没法转化到枯草中去,但是穿梭载体可以,我不知道是目的基因有细胞毒性还他可以是卡那霉素(枯草阳性筛选基因)失活。能否谈谈你的看法,还有,能否把你的论文先给我看看 ,看看你的分析,谢谢
4楼2015-01-03 03:51:16
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ls2046

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★ ★
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kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-12-22 15:53:19
p43和pQ差不多,pQ既然可以,p43应该也是可以的。
参见江南大学硕士论文:《新型启动子PQ介导高温a-淀粉酶表达的研究》,作者佟小雪
一品黄山
2楼2014-12-22 08:52:47
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bolysu

禁虫 (著名写手)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖内容被屏蔽

3楼2014-12-22 10:16:58
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我是空气1993

新虫 (初入文坛)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我想把P43启动子连到GFP上,想知道P43启动子的序列是怎样的。
5楼2015-07-13 17:17:50
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