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kekejia

铜虫 (初入文坛)

[求助] 双启动子表达菌株的构建

想要增强芽孢杆菌的表达量,现在想往其原由的启动子上游插入一个启动子,这样就构成了双启动子,但是我想求助一下这个新插入的启动子应该在原有启动子上游多少bp处插入啊,急求啊!!!!!!!!!!!!!!!!!!
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三目

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

几十bp吧,我看到有些人是选择反向的,这篇文献让你参考下,希望对你有帮助。http://www.tjyybjb.ac.cn/qikan/manage/wenzhang/tjyy46292.pdf
2楼2011-10-21 10:17:45
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


wanhscn(金币+1): 鼓励交流 2011-11-16 10:48:10
我觉的你这个思路很值得再思考一下呀,为什么要用双启动子呢,一个强启动子足够了呀,再说表达量不高的问题不一定是出在转录这一步的呀
3楼2011-10-21 10:23:33
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2008116068

木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by ganchao1776 at 2011-10-21 10:23:33:
我觉的你这个思路很值得再思考一下呀,为什么要用双启动子呢,一个强启动子足够了呀,再说表达量不高的问题不一定是出在转录这一步的呀

这位大侠,问你个问题,我有一个fosmid质粒,上有一个32K的基因,现在想要这个质粒表达,是不是前面加一个强启动子就可以了?
只要踮起脚尖,就离太阳更近一点!!!
4楼2011-11-15 18:36:55
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 2008116068 at 2011-11-15 18:36:55:
这位大侠,问你个问题,我有一个fosmid质粒,上有一个32K的基因,现在想要这个质粒表达,是不是前面加一个强启动子就可以了?

你可以试试的,但有的时候强启动子不一定效果就好,启动子的位置很重要的
5楼2011-11-15 21:46:47
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2008116068

木虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by ganchao1776 at 2011-11-15 21:46:47:
你可以试试的,但有的时候强启动子不一定效果就好,启动子的位置很重要的

那放在什么位置比较好呢?求详解。O(∩_∩)O谢谢
只要踮起脚尖,就离太阳更近一点!!!
6楼2011-11-17 09:22:13
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 2008116068 at 2011-11-17 09:22:13:
那放在什么位置比较好呢?求详解。O(∩_∩)O谢谢

这个你自己查一下资料吧,不同的宿主对启动子位置的要求不同的
7楼2011-11-17 12:59:59
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