| 查看: 4786 | 回复: 3 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
flyaway7585金虫 (正式写手)
|
[求助]
荧光定量扩增不出来 很多检测不到信号是为什么？ 已有1人参与
|
|
跑荧光定量很多样品检测不到信号，能检测到的也是30左右，一两个是12左右的Ct值，内参和目的基因都是一样的情况。为了排除RNA降解的情况，对RNA进行了变性电泳，发现没有降解。为了消除反转的影响，又重新进行了反转，反转后浓度为2000左右，用反转的产物进行PCR扩增发现条带很亮。为了消除荧光染料的影响，借用别人的染料重新跑了一次还是一样的结果。 染料用的是罗氏的，反应体系为：10ul，上下游引物0.3ul，cDNA反转后不稀释（稀释2倍都做过）加1ul，5ul染料，3.4ul水。 1、2、3、4、5分别是RNA电泳图、PCR扩增后电泳图、荧光定量扩增图、荧光定量后对产物跑的电泳图、溶解曲线图。求助各位大侠，到底是哪里出问题了，在线等，谢谢！ 1  PCR.jpg  4.jpg  荧光定量PCRjieguo.jpg  5.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有238人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 荧光定量试验扩增曲线近似一条直线是怎么回事
已经有8人回复
- 实时荧光定量PCR和定量PCR有什么区别？
已经有14人回复
- 荧光定量PCR 扩增曲线求助
已经有24人回复
- 荧光定量Pcr问题求助
已经有7人回复
- 你们的荧光定量检测引物扩增的标准曲线问题！求指教
已经有4人回复
- 荧光定量PCR溶解曲线问题
已经有8人回复
- 急求荧光实时定量PCR内参法实验步骤，最好能给我一篇详细点的论文
已经有14人回复
- 求助荧光定量扩增曲线分析，谢谢！
已经有4人回复
- 荧光定量PCR扩增曲线怎么成这样了呢？为什么?
已经有15人回复
- 荧光定量扩增效率问题
已经有6人回复
- 荧光定量PCR进行二重检测怎样处理FAM 和VIC信号相互干扰的问题？（ABI StepOne Plus）
已经有3人回复
- 关于荧光定量PCR基因扩增的问题
已经有5人回复
- taqman荧光定量PCR交流
已经有30人回复
- 荧光pcr阴性对照有扩增
已经有12人回复
- 荧光定量PCR设计了三对引物了，都扩增不出来，郁闷啊
已经有4人回复
- 荧光定量PCR的扩增曲线很奇怪，什么原因
已经有7人回复
- 荧光定量扩增效率低怎么办
已经有3人回复
- 【求助/交流】荧光定量pcr出现直线扩增曲线，求指导
已经有5人回复
- 【求助/交流】荧光PCR扩增曲线问题
已经有18人回复
- 【求助/交流】实时荧光定量PCR的扩增效率低该如何改进？
已经有5人回复
- 【求助/交流】PCR扩增模板精确定量:两个拷贝or三个拷贝的试验方法
已经有12人回复
4楼2019-09-25 13:43:36
2楼2014-12-16 09:10:03
小鱼1988
铁虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 3277.6
- 散金: 10
- 帖子: 116
- 在线: 35.2小时
- 虫号: 2005596
- 注册: 2012-09-16
- 专业: 微生物生理与生物化学
3楼2019-09-24 20:33:50
20