24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 917  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

danielyoung

银虫 (初入文坛)

[求助] 想把片段大小在2k-4k的片段连接到载体上,求推荐高效简便的载体 已有1人参与

最近用EcoRI 酶切得到了一些2k-4k的片段,想把他们与载体连接,求高手推荐一个高效的连接载体,本身不是太了解,做实验用到了,实验室有PUC19,这个可以吗?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)

puc19,pbluescript 等都可以。我用puc19连接过30kb没问题的。
4楼2014-12-03 16:44:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

gaoxueyan188

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励新虫应助! 2014-12-02 20:59:39
danielyoung: 金币+6, 有帮助 2014-12-03 09:12:09
使用PUC19作为载体是没有问题的,但是要注意筛选时要用麦康凯培养基,或者用普通LB加上X-gal染料。另外菌落PCR时大于2K的片段最好不要用rTaq,可以用EXtaq。如果答案满意还请楼主赠与金币。
2楼2014-12-02 11:15:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

danielyoung

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gaoxueyan188 at 2014-12-02 11:15:14
使用PUC19作为载体是没有问题的,但是要注意筛选时要用麦康凯培养基,或者用普通LB加上X-gal染料。另外菌落PCR时大于2K的片段最好不要用rTaq,可以用EXtaq。如果答案满意还请楼主赠与金币。

那还有哪一种载体可用呢?
3楼2014-12-02 20:25:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

香菱儿

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 克隆大虾 at 2014-12-03 16:44:46
puc19,pbluescript 等都可以。我用puc19连接过30kb没问题的。

pUC19能连接上30K的片段啊,太牛了,请教下细节问题啊。。我用pCAMBIA系列植物表达载体连5Kb的都没连上。。。惭愧。。。。。。
漫洒英雄泪,相离处士家。谢慈悲剃度在莲台下。没缘法转眼分离乍。赤条条来去无牵挂。那里讨烟蓑雨笠卷单行?一任俺芒鞋破钵随缘化!
5楼2015-12-13 16:23:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +4 hanamiko 2026-03-27 4/200 2026-03-28 04:16 by fmesaito
[考研] 求调剂 +4 零八# 2026-03-27 4/200 2026-03-27 18:07 by yu221
[考研] 考研调剂 +4 Sanmu-124 2026-03-26 4/200 2026-03-27 17:49 by kiokin
[考研] 085600材料与化工调剂 +10 A-哆啦Z梦 2026-03-23 16/800 2026-03-27 15:13 by caszguilin
[考研] 333求调剂 +3 question挽风 2026-03-23 3/150 2026-03-27 11:29 by 不吃魚的貓
[考研] 284求调剂 +11 junqihahaha 2026-03-26 12/600 2026-03-27 04:37 by wxiongid
[考研] 321求调剂 +6 Ymlll 2026-03-24 6/300 2026-03-26 20:50 by 不吃魚的貓
[考研] 327求调剂 +7 prayer13 2026-03-23 7/350 2026-03-26 20:48 by 不吃魚的貓
[考研] 286求调剂 +13 Faune 2026-03-21 13/650 2026-03-26 19:52 by peike
[考研] 一志愿211 初试270分 求调剂 +6 谷雨上岸 2026-03-23 7/350 2026-03-26 18:55 by 不吃魚的貓
[考研] 334分 一志愿武理 材料求调剂 +4 李李不服输 2026-03-26 4/200 2026-03-26 16:00 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿哈工大,085400,320,求调剂 +4 gdlf9999 2026-03-24 4/200 2026-03-25 23:01 by boxking200
[考研] 0854电子信息求调剂 +7 α____ 2026-03-22 9/450 2026-03-25 13:37 by α____
[考研] 材料调剂 +3 iwinso 2026-03-23 3/150 2026-03-25 11:29 by greychen00
[考研] 一志愿吉林大学材料与化工303分求调剂 +4 为学666 2026-03-24 4/200 2026-03-25 11:27 by BruceLiu320
[考研] 318求调剂 +3 plum李子 2026-03-23 3/150 2026-03-25 09:42 by 雾散后相遇lc
[考研] 一志愿河北工业大学0817化工278分求调剂 +7 jhybd 2026-03-23 12/600 2026-03-24 09:03 by jhybd
[考研] 环境学硕288求调剂 +8 皮皮皮123456 2026-03-22 8/400 2026-03-23 23:47 by 热情沙漠
[考研] 333求调剂 +3 ALULU4408 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:04 by macy2011
[考研] 276求调剂 +3 YNRYG 2026-03-21 4/200 2026-03-23 08:31 by 醉在风里
信息提示
请填处理意见