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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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liliman2005

新虫 (初入文坛)

[求助] PET-28a克隆问题 已有1人参与

PET-28a 选择EcoRI和BamhI为酶切位点,进行诱导表达,SDS-PAGE电泳的话,标签蛋白是哪个??大小是多大?都在N端吗?刚开始接触  不太懂,网大神指点啊!
还有PET-30a是什么情况呢?与选择的酶切位点有什么关系?
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liliman2005

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2014-11-28 07:15:09
pet28a 蛋白标签是his-tag, 在N端,算上中间的thrombin酶切位点大概有3kDa.
如果克隆的片段没有终止密码子,也没有移码,C端也有个his-tag
pet30a没什么情况,就是另外个质粒,和选择酶切位点没关系

非常感谢
3楼2014-11-28 09:15:52
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
pet28a 蛋白标签是his-tag, 在N端,算上中间的thrombin酶切位点大概有3kDa.
如果克隆的片段没有终止密码子,也没有移码,C端也有个his-tag
pet30a没什么情况,就是另外个质粒,和选择酶切位点没关系
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2014-11-28 07:15:09
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