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liliman2005

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[求助] PET-28a克隆问题已有1人参与

PET-28a 选择EcoRI和BamhI为酶切位点，进行诱导表达，SDS-PAGE电泳的话，标签蛋白是哪个？？大小是多大？都在N端吗？刚开始接触不太懂，网大神指点啊！
还有PET-30a是什么情况呢？与选择的酶切位点有什么关系？

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1楼2014-11-27 16:59:08

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fuyuandj86

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【答案】应助回帖

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pet28a 蛋白标签是his-tag, 在N端，算上中间的thrombin酶切位点大概有3kDa.
如果克隆的片段没有终止密码子，也没有移码，C端也有个his-tag
pet30a没什么情况，就是另外个质粒，和选择酶切位点没关系

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2楼2014-11-28 07:15:09

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liliman2005

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2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2014-11-28 07:15:09
pet28a 蛋白标签是his-tag, 在N端，算上中间的thrombin酶切位点大概有3kDa.
如果克隆的片段没有终止密码子，也没有移码，C端也有个his-tag
pet30a没什么情况，就是另外个质粒，和选择酶切位点没关系

非常感谢

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3楼2014-11-28 09:15:52

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