应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 关于凝胶回收浓度以及质粒抽提的浓度问题
51/1返回列表
查看: 2206  |  回复: 16
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

liuwukang

新虫 (小有名气)

[求助] 关于凝胶回收浓度以及质粒抽提的浓度问题 已有5人参与

本人刚刚研一，做微生物的基因敲除，现在处在构建电转化的载体阶段，想请教两个问题：
1、pcr之后条带很亮而且做了好几管，但是回收的浓度总是上不来，一直在80到100ng/μL左右，因为后期需要酶切，这个浓度稍微有些低，用的是天根的试剂盒，是操作的问题吗？有没有什么改进的方法，有经验的师兄师姐们给点建议
2、质粒抽提时，浓度时高时低，养菌的时间一般也都差不多，这是怎么回事呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-11-22 22:42:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuwukang

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by myheat at 2014-11-23 12:40:47
这个浓度足以你做n次连接的。继续往下看

请问做连接时一般多少的浓度是最低限？
赞一下 回复此楼
5楼2014-11-23 21:21:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 17 个回答

飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
liuwukang(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-11-23 13:20:41
那个试剂盒我用过，你这样，酒精洗完干燥5min，然后加入elution buffer以后再盖盖溶解5min然后离心即可！
赞一下 回复此楼
人生贵在行动，迟疑不决时，不妨先迈出小小一步。
2楼2014-11-23 10:32:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuwukang

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2014-11-23 10:32:14
那个试剂盒我用过，你这样，酒精洗完干燥5min，然后加入elution buffer以后再盖盖溶解5min然后离心即可！

嗯，今天打算多干燥一会再洗，另问，洗脱用50uL可以吗？多了还是少了？
赞一下 回复此楼
3楼2014-11-23 12:04:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

myheat

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个浓度足以你做n次连接的。继续往下看

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
4楼2014-11-23 12:40:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 17 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭