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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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liuwukang

新虫 (小有名气)

[求助] 关于凝胶回收浓度以及质粒抽提的浓度问题 已有5人参与

本人刚刚研一,做微生物的基因敲除,现在处在构建电转化的载体阶段,想请教两个问题:
1、pcr之后条带很亮而且做了好几管,但是回收的浓度总是上不来,一直在80到100ng/μL左右,因为后期需要酶切,这个浓度稍微有些低,用的是天根的试剂盒,是操作的问题吗?有没有什么改进的方法,有经验的师兄师姐们给点建议
2、质粒抽提时,浓度时高时低,养菌的时间一般也都差不多,这是怎么回事呢?
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liuwukang

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2014-11-23 10:32:14
那个试剂盒我用过,你这样,酒精洗完干燥5min,然后加入elution buffer以后再盖盖溶解5min然后离心即可!

嗯,今天打算多干燥一会再洗,另问,洗脱用50uL可以吗?多了还是少了?
3楼2014-11-23 12:04:39
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
liuwukang(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-11-23 13:20:41
那个试剂盒我用过,你这样,酒精洗完干燥5min,然后加入elution buffer以后再盖盖溶解5min然后离心即可!
人生贵在行动,迟疑不决时,不妨先迈出小小一步。
2楼2014-11-23 10:32:14
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myheat

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个浓度足以你做n次连接的。继续往下看

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2014-11-23 12:40:47
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liuwukang

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by myheat at 2014-11-23 12:40:47
这个浓度足以你做n次连接的。继续往下看

请问做连接时一般多少的浓度是最低限?
5楼2014-11-23 21:21:37
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