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382982408

银虫 (小有名气)

[交流] 荧光定量PCR (RT-PCR)实验求助 已有3人参与

各位大牛,大家好,现在做RT PCR 反应遇到一个问题,用的是SYBR MIX,LOG曲线中间几个循环出现断裂,但扩增期的曲线最好还是起来了。liner曲线呈现S形,感觉没有问题,这是什么原因呢??????

另外,melt curve也没有出现双峰,结果也比较好。

荧光定量PCR (RT-PCR)实验求助
yushiyan.jpg


荧光定量PCR (RT-PCR)实验求助-1
yushiyan LOG curve .jpg


荧光定量PCR (RT-PCR)实验求助-2
yushiyan melt curve  20141106.jpg
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382982408

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bbqlhb at 2014-11-06 15:27:51
没问题的,那个图我通常都不看的

那具体要看哪个图呢?这个图中间怎么断裂了呢?是机器没有 采集荧光数据吗?
3楼2014-11-06 15:30:03
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bbqlhb

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
没问题的,那个图我通常都不看的
2楼2014-11-06 15:27:51
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bbqlhb

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 382982408 at 2014-11-06 15:30:03
那具体要看哪个图呢?这个图中间怎么断裂了呢?是机器没有 采集荧光数据吗?...

log图是这样断开的。。你把它切换为linear图,上面下拉菜单可以选择,一目了然了
4楼2014-11-06 15:36:54
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382982408

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by bbqlhb at 2014-11-06 15:36:54
log图是这样断开的。。你把它切换为linear图,上面下拉菜单可以选择,一目了然了...

嗦嘎   呵呵
5楼2014-11-06 16:10:11
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