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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 荧光定量PCR （RT-PCR）实验求助
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382982408

银虫 (小有名气)

[交流] 荧光定量PCR （RT-PCR）实验求助 已有3人参与

各位大牛，大家好，现在做RT PCR 反应遇到一个问题，用的是SYBR MIX，LOG曲线中间几个循环出现断裂，但扩增期的曲线最好还是起来了。liner曲线呈现S形，感觉没有问题，这是什么原因呢？？？？？？

另外，melt curve也没有出现双峰，结果也比较好。

荧光定量PCR （RT-PCR）实验求助
yushiyan.jpg


荧光定量PCR （RT-PCR）实验求助-1
yushiyan LOG curve .jpg


荧光定量PCR （RT-PCR）实验求助-2
yushiyan melt curve  20141106.jpg
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1楼 2014-11-06 15:22:05
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bbqlhb

木虫 (小有名气)
★
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没问题的，那个图我通常都不看的
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2楼2014-11-06 15:27:51
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382982408

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bbqlhb at 2014-11-06 15:27:51
没问题的，那个图我通常都不看的

那具体要看哪个图呢？这个图中间怎么断裂了呢？是机器没有 采集荧光数据吗？
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3楼2014-11-06 15:30:03
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bbqlhb

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 382982408 at 2014-11-06 15:30:03
那具体要看哪个图呢？这个图中间怎么断裂了呢？是机器没有 采集荧光数据吗？...

log图是这样断开的。。你把它切换为linear图，上面下拉菜单可以选择，一目了然了
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4楼2014-11-06 15:36:54
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382982408

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by bbqlhb at 2014-11-06 15:36:54
log图是这样断开的。。你把它切换为linear图，上面下拉菜单可以选择，一目了然了...

嗦嘎   呵呵
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5楼2014-11-06 16:10:11
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willychen34

木虫 (著名写手)
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感觉怪怪的，可能仪器不一样，我的是伯乐做的。。。溶解曲线好像没有问题。
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所谓兵来将挡，水来土掩，总有一天，会实现的。
6楼2014-11-09 19:22:01
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冷雁孤旅

木虫 (著名写手)
★
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图是正常的，你要是换成线形图就可以看出来是连续的了
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生命不息奋斗不止
7楼2014-11-09 21:01:44
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