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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 做SDS-PAGE蛋白电泳，蛋白条带跑不出来
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zzx1123

铁虫 (初入文坛)

[求助] 做SDS-PAGE蛋白电泳，蛋白条带跑不出来 已有1人参与

我是做真菌粗酶液的SDS-PAGE蛋白电泳，mark条带能跑出来，条带清晰度也很不错，但是样品条带没有跑出来，我的粗酶液样品浓度均在0.03-0.08mg/ml浓度范围，上样量是20ul,请问是不是蛋白浓度过低没有跑出来，SDS-PAGE电泳要求蛋白浓度至少为多少呢？
请各位指教，不甚感激
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don'tgiveup
1楼 2014-11-03 15:32:53
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xyj114114

木虫 (著名写手)
加大蛋白浓度试试，很可能出条带；蛋白浓度因菌株不同上样量也不同。另外配胶注意分离胶的浓度问题。
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2楼2014-11-04 07:23:10
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zzx1123

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xyj114114 at 2014-11-04 07:23:10
加大蛋白浓度试试，很可能出条带；蛋白浓度因菌株不同上样量也不同。另外配胶注意分离胶的浓度问题。

我的分离胶选用的是10％，应该没问题吧

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don'tgiveup
3楼2014-11-04 10:20:13
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linyingjia

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
上样的蛋白量不少嘛    银染能看到不
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4楼2014-11-04 19:04:48
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zzx1123

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by linyingjia at 2014-11-04 19:04:48
上样的蛋白量不少嘛    银染能看到不

银染还没有试，还有我这是用粗酶液直接上样，需不需要硫胺沉淀后上样啊？

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don'tgiveup
5楼2014-11-04 23:22:46
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linyingjia

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by zzx1123 at 2014-11-04 23:22:46
银染还没有试，还有我这是用粗酶液直接上样，需不需要硫胺沉淀后上样啊？
...

应该行吧。当浓缩呗

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6楼2014-11-04 23:50:33
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